Análise estrutural da matriz extracelular e do músculo estriado uretral em ratas prenhes diabéticas

Resumo

Diabetes mellitus durante a gestação está associado com altos níveis de incontinência urinária e disfunção muscular do assoalho pélvico. Trabalho prévio desenvolvido por nosso grupo de estudo mostrou diversos efeitos do diabete grave (glicemia superior a 300 mg/dL) na musculatura estriada uretral em ratas prenhes, entre eles: atrofia, adelgaçamento e mudança na distribuição e no tipo de fibra muscular. Para realização deste projeto, foi usado o modelo experimental de ratas prenhes com diabete de menor intensidade glicêmica (glicemia entre 120 e 300 mg/dL, i. e., diabete moderado), a fim de se estabelecer uma maior correlação com os níveis glicêmicos encontrados na clínica. Desta forma, após a retirada e processamento da uretra, pretende-se analisar a estrutura da matriz extracelular e do músculo estriado uretral dessas ratas em parceria com a "Case Western Reserve University". Foram utilizadas 92 ratas Wistar distribuídas em quatro grupos: virgem, prenhe, diabético virgem e diabético prenhe. Os três primeiros grupos foram considerados como controle do grupo principal, o diabético prenhe. O diabete moderado foi induzido no 1º dia de nascimento por administração subcutânea de streptozotocin na dose de 100 mg/kg de peso corporal. O critério de inclusão foram dois ou mais pontos glicêmicos alterados no teste de tolerância à glicose realizado no 1º dia de prenhez. No final do experimento, as ratas foram anestesiadas, eutanasiadas e a vagina e a uretra foram retiradas em monobloco. Algumas amostras foram congeladas em nitrogênio líquido e mantidas a -80°C para posteriores cortes em criostato (6 µm de espessura) e outras amostras foram fixadas em paraformaldeído, emblocados em paraplast, cortados em micrótomo (4 µm de espessura) e submetidos às colorações citoquímicas para posterior análise dos componentes da matriz extracelular e do músculo estriado uretral. Serão feitas análises morfométricas de espessura da camada muscular, espessura da camada de lâmina própria e da área de tecido conjuntivo ao redor do músculo estriado uretral dos quatro grupos. A nossa hipótese é que, no binômio diabete e prenhez, a análise conjunta do músculo estriado uretral e da matriz extracelular evidencie que a alteração da composição deste músculo induz à remodelação tecidual na qual a matriz assume papel fundamental. Além disso, espera-se compreender melhor os efeitos estruturais da interação diabete e prenhez sobre a matriz extracelular e sobre o músculo estriado uretral, além de verificar se o diabete moderado (glicemia entre 120-300mg/dL) acarreta alterações musculares similares às que foram encontradas no diabete grave (glicemia > 300mg/dL). (AU)