Imunoreatividade das células glias em encéfalos de ratos recém-nascidos e adultos, após estimulação dolorosa no período neonatal

Resumo

O objetivo do presente estudo é avaliar o desenvolvimento sensório-motor de ratos Wistar fêmeas e machos submetidos a procedimentos dolorosos e táteis ao nascimento, em diferentes idades, comparando os aspectos morfológicos e morfométricos do nervo sural. Além disto, o presente estudo pretende verificar as possíveis modificações nas áreas pré-frontal, insula anterior, cíngulo anterior, córtex somatossensorial decorrentes dos procedimentos dolorosos. Para tanto foram utilizados 48 animais, separados em 8 grupos experimentais: I (6 ratas controles com 15 dias de vida); II (6 ratos controles com 15 dias de vida); III (6 ratas controles com 180 dias de vida); IV (6 ratos controles com 180 dias de vida); V (6 ratas com 15 dias de vida, submetidas a procedimentos dolorosos no período neonatal); VI (6 ratos com 15 dias de vida, submetidas a procedimentos dolorosos no período neonatal); VII (6 ratas com 180 dias de vida, submetidas a procedimentos dolorosos no período neonatal); VIII (6 ratos com 180 dias de vida, submetidas a procedimentos dolorosos no período neonatal). Para avaliação da dor foram realizados os testes de pressão da pata e de estimulação tátil. Para avaliação da função motora foi realizado o Teste de Avaliação Funcional do Tibial. Os animais, então, foram pesados, anestesiados, seus nervos surais direito e esquerdo foram dissecados, imersos em solução fixadora de glutaraldeído e permaneceram em agitação orbital contínua por 72 horas. Após a dissecação dos nervos, os animais foram, então, perfundidos com uma solução de tampão salina (PBS 0,1M; pH 7,4), seguida de uma solução fixadora de paraformoldeído a 4%, em seguida, os encéfalos foram dissecados. Após o preparo com técnicas histológicas convencionais, secções transversais dos nervos surais foram obtidas para análise em microscopia de luz. A morfometria foi realizada com o auxílio de um sistema analisador de imagens computacional (em análise). A análise dos nervos surais em microscopia eletrônica de transmissão será realizada no estágio no exterior, no JEM-1230 (JEOL Ltda.), no "Central Microscopy Facility", na Universidade de Iowa. Além disto, a dupla marcação e a análise da imunofluorescencia em células gliais de encéfalo serão realizadas no estágio no exterior, no "Neurobiology of Pain Laboratory", na Universidade de Iowa. A análise estatística dos dados será realizada através de testes estatísticos específicos. Considerar-se-á diferenças significativas quando p<0,05. (AU)