Detecção do EcPV-3 e EcPV-4 em amostras de placa aural equina incluídas em parafina usando a PCR

Resumo

A placa aural é uma doença cosmopolita que causa desconforto aos animais e prejuízos aos proprietários. Quatro tipos de Equus caballus papillomavirus (EcPV) foram identificados. Destes, dois foram associados à placa aural, EcPV-3 e 4. A detecção do EcPV-3 e/ou 4 por PCR utilizando amostras de placas aurais conservadas em formalina e embebidas em parafina ainda não foi realizada com sucesso. Portanto, o objetivo desse estudo será detectar o DNA do EcPV-3 e 4, por PCR, em amostras de pele auricular conservadas em formalina e embebidas em parafina. Estas amostras, proveniente de 10 equinos infectados naturalmente, possuem diagnóstico clínico-histológico de placa aural e EcPV-3 e/ou 4 já foi detectado nestas amostras por PCR realizado após a colheita (amostras ainda frescas). O DNA será extraído das amostras (blocos de parafina) com o kit de purificação do DNA de tecidos fixados em formalina e embebidos em parafina. A PCR será padronizada utilizando o DNA extraído e primers específicos para EcPV-3 ou EcPV-4. Os produtos de PCR positivos serão purificados e sequenciados, e as sequências obtidas, comparadas com as sequências depositadas no GenBank, para confirmar o diagnóstico. Este teste auxiliará o diagnóstico etiológico da placa aural e possibilitará a realização de estudos retrospectivos em amostras provenientes de arquivos histológicos. (AU)