Investigação do papel da enzima ciclooxigenase-2 na reabsorção óssea periapical induzida pelo lipopolissacarídeo bacteriano

Resumo

Durante a resposta inflamatória, diversos mediadores são liberados localmente com o objetivo de estimular a resposta imune celular e humoral. Por meio da ação da enzima ciclooxigenase-2 ocorrem modificações estruturais na cadeia do ácido araquidônico levando a síntese de prostaglandinas, potenciais responsáveis pela regulação do metabolismo ósseo durante eventos inflamatórios. Dessa maneira, o objetivo deste estudo será avaliar o papel da enzima ciclooxigenase-2 na reabsorção óssea periapical e na expressão de genes envolvidos no metabolismo ósseo, após inoculação de lipopolissacarídeo bacteriano (LPS) nos canais radiculares de molares de camundongos. Serão utilizados 120 camundongos C57BL/6, com 6 semanas de idade, pesando de 18 a 20 gramas, nos quais serão inoculados nos canais radiculares dos primeiros molares uma solução contendo lipopolissacarídeo bacteriano de E. coli (1,0mg/ml). Decorridos os períodos experimentais de 7, 14, 21 e 28 dias, os animais serão submetidos à eutanásia e os blocos contendo dente e osso serão removidos para processamento histológico e extração de RNA. Cortes histológicos serão realizados, corados por hematoxilina e eosina, marcados para imunoistoquímica para COX-2, RANK, RANKL e OPG e analisados por microscopia de luz convencional e fluorescência. Em seguida, será realizada a avaliação da expressão gênica por meio de transcrição reversa e reação da polimerase em cadeia em tempo real (qRT-PCR), utilizando o sistema TaqMan® e por meio de um ensaio de PCR Array (Osteogenesis RT² Profiler PCR Array). Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística de acordo com a distribuição dos dados.