Clonagem, expressão e caracterização do hormônio folículo estimulante (FSH) e luteinizante (LH) de pirarucu (Arapaima gigas)

Resumo

O Arapaima gigas (pirarucu) é encontrado nas bacias hidrográficas do Amazonas, do São Francisco e do Nordeste, sendo uma espécie importante para o extrativismo regional e a criação comercial no Brasil e constando na lista de animais sobre explorados do Instituto Brasileiro do Meio Ambiente (IBAMA) e ameaçados de acordo com a "Convention on International Trade of Endangered Species of Wild Fauna and Flora" (CITES, Appendix II). Além disto, como outros peixes criados em cativeiro, de um modo geral apresenta dificuldade na ovulação e na espermiação. Essas falências reprodutivas estão ligadas a fatores hormonais do eixo hipotálamo-hipófise e em particular aos hormônios gonadotróficos(GTH,) sendo estes o hormônio luteinizante (LH) e o hormônio folículo estimulante (FSH). Ressaltamos que atualmente, diversas espécies de peixes já possuem seus LH e FSH clonados e sequenciados, nenhuma, porém, destas espécies pertence à ordem dos osteoglossiformes ou até à superordem dos osteoglossomorpha, às quais pertence o gênero Arapaima. No intuito de investigar a fisiologia do A. gigas, podendo assim chegar a controlar e melhorar sua capacidade reprodutiva especialmente no cativeiro, nós propomos, no presente estudo, clonar e expressar os hormônios LH e FSH desta espécie. Considerando que neste laboratório já foi clonado e seqüenciado o gene da subunidade alfa, comum às duas gonadotrofinas, a partir de hipófises de A.gigas, serão agora isolados e seqüenciados, pela primeira vez, os cDNAs correspondentes às subunidades beta das duas gonadotrofinas (FSH e LH). As respectivas subunidades (alfa e beta) de cada hormônio serão então inseridas em vetores apropriados para expressão dos dois hormônios em células de ovários de hamster chinês (CHO). Deste modo, serão sintetizados, purificados e caracterizados o LH e FSH recombinantes do A. gigas(r-agFSH e r-agLH), permitindo assim maiores estudos relativos à reprodução deste peixe,que é considerado o maior entre as espécies de água doce existentes e que representa uma grande reserva alimentícia e econômica para a região. (AU)