Efeitos da alternagina-C (ALT-C), uma proteína extraída do veneno da serpente Urutu (Rhinocerophis alternatus, antiga Bothrops alternatus), sobre a contratilidade cardíaca de peixe em normóxia e frente à hipóxia tecidual

Resumo

Estudos recentes comprovaram que a alternagina-C (ALT-C), uma proteína tipo desintegrina extraída do veneno da serpente urutu (R. alternatus), é capaz de promover a angiogênese in vivo e a migração e proliferação de células endoteliais in vitro. Tal molécula, portanto, possui potencial para ser utilizada na indústria farmacêutica, como coadjuvante em terapias pró-angiogênicas essenciais em terapias para as doenças cardiovasculares. O projeto de pesquisa propõe uma investigação sobre o efeito da ALT-C sobre a contratilidade miocárdica de peixe com o intuito de investigar se essa desintegrina atua modulando positivamente o acoplamento excitação-contração (EC) dos miócitos através da indução de angiogênese e modulação das vias de sinalização Ca2+-dependentes, melhorando a força de contração, a capacidade de bombeamento cardíaco e a resistência desse tecido à hipóxia. Para tanto será realizada a purificação da proteína a partir do veneno liofilizado de B. alternatus por dupla filtração seguida de cromatografia de troca aniônica. Os peixes receberão uma dose única intravenosa de ALT-C e após 7 dias, os mecanismos envolvidos na contratilidade do músculo cardíaco in vitro serão avaliados em normóxia ou em hipóxia. A dose será escolhida a partir da identificação de uma curva dose-resposta. Também serão realizadas as seguintes análises: quantificação do fator crescimento endotelial vascular (VEGF) através do ensaio ELISA; expressão das proteínas envolvidas no acoplamento EC (trocador Na+/Ca2+; Ca2+-ATPase do retículo sarcoplasmático e fosfolambam) por Western-blot, avaliação do número de vasos sanguíneos no miocárdio bem como a diferenciação de colágeno por microscopia de luz e a marcação de células endoteliais por imunohistoquímica. (AU)