Reparo ósseo de defeitos de tamanho crítico tratados com aspirado de medula óssea associado ou não a terapia com laser em baixa intensidade: estudo imunohistoquímico em calvárias de ratos

Resumo

O propósito deste estudo é avaliar, através de imunorreações, o processo de cicatrização óssea em defeitos de tamanho crítico (DTC), criados cirurgicamente em calvárias de ratos e tratados com aspirado de medula óssea (AMO), laser em baixa intensidade (LLLT) ou a associação de ambas as terapias. 80 ratos serão divididos em 4 grupos: C (controle), AMO, LLLT e AMO/LLLT. Um DTC de 5 mm de diâmetro será criado na calvária de cada animal. No Grupo C, o defeito será preenchido com coágulo sanguíneo somente. No Grupo AMO, o defeito será preenchido com AMO. Nos grupos LLLT e AMO/LLLT, o defeito receberá aplicação da LLLT (InGaAlP laser), será preenchido com coágulo sanguíneo e AMO, respectivamente, e receberá novamente a aplicação da LLLT. As células-tronco mesenquimais (CTM) presentes nas amostras de AMO serão quantificadas através de citometria de fluxo. Os animais serão submetidos à eutanásia aos 15 ou 30 dias pós-operatórios. Os sítios dos defeitos serão removidos e processados laboratorialmente para inclusão em parafina. Serão realizados cortes seriados de 5 micrometros de espessura no sentido longitudinal à sutura sagital. Alguns cortes serão submetidos a reações imunoistoquímicas para detecção do antígeno nuclear de proliferação celular (PCNA), fator de transcrição relacionado à Runt (RUNX-2), BMP-2, osteocalcina (OC), osteopontina (OP) e fator de crescimento endotelial vascular (VEGF). A análise dos resultados será realizada através de microscopia óptica de campo claro. Os dados obtidos serão submetidos à análise estatística. (AU)