Estudo do efeito da Terapia Fotodinâmica Antimicrobiana no tratamento de candidose oral induzida em língua de camundongo. Avaliação in vivo de um hidrogel de Photodithazine e nanoemulsão catiônica de Cloro Alumínio Ftalocianina .

Resumo

Este trabalho tem por objetivo avaliar a efetividade da terapia fotodinâmica (PDT) mediada pelos fotossensibilizadorer (FS) hidrogel de Photodithazine® (PDZ) e nanoemulsão catiônica de cloro-alumínio-ftalocianina (ClAlPc), associado à luz LED (660nm). Para isso, serão utilizados 132 camundongos com aproximadamente 6 semanas de vida, os quais serão submetidos a indução de candidose no dorso da língua. Inicialmente os animais serão imunossuprimidos com injeções subcutâneas de predinisolona 100mg/kg no 1º, 5º e 9º dia de experimento. No 2º dia, uma suspensão celular padronizada será preparada e ajustada a 107 Ufc/mL. Os animais serão sedados com 0,1mL de cloridrato de clorpromazina 2mg/mL, e então a inoculação de C. albicans na língua dos mesmos por meio de swabs embebidos na suspensão será realizada. A PDT será realizada durante 5 dias consecutivos. Para isso os FSs serão avaliados nas concentrações de 100mg/L para PDZ e 31,7µM para ClAlPc, associados a dose de luz de 37,5 J/cm2 100J/cm2, respectivamente. Tais grupos experimentais serão denominados de P+L+ 100mg/L, P+L+ 31,7µM. Para a verificação apenas do efeito da PDZ ou ClAlPc, os mesmos serão aplicados na língua dos animais, porém sem iluminação. Esses grupos serão denominados P+L- 100mg/L, P+L- 31,7µM. Para averiguação do efeito da luz, todos os animais pertencentes a esses grupo terão suas línguas iluminadas com dose de luz de 37,5J/cm2 para PDZ e 100J/cm2 para ClAlPc, porém sem a aplicação de FS. Tais grupos serão denominados de P-L+ 37,5J/cm2 e P-L+ 100J/cm2. Um grupo receberá apenas inoculação por Candida (grupo P-L- , controle positivo), outro grupo não receberá nenhum tratamento e nem inoculação fúngica (grupo CN - controle negativo). Para efeito de comparação, haverá um grupo nos quais os animais serão tratados com Nistatina (grupo - Nis) 2 vezes ao dia por 5 dias. Após os experimentos a recuperação de C. albicans das línguas dos animais por meio de swabs será realizada. Esses swabs serão embebidos em tubos com 1mL de solução salina, e diluições seriadas serão realizadas e colocadas em placas de petri com SDA a 37º C por 48 horas. As células fúngicas sobreviventes serão quantificadas e o número de Ufc/mL determinado. Os camundongos serão sacrificados imediatamente e 7 dias após os tratamentos, as línguas serão removidas cirurgicamente para realização da análise histológica e análise biomolecular para avaliação da presença de citocinas pré e anti inflamatórias. Adicionalmente, após os tratamentos instituídos, as células fúngicas serão submetidas a análise da danos ao núcleo celular, e também análise biomolecular para verificação de produção de proteinase. Os resultados serão avaliados pelo método estatístico mais apropriado.