Avaliação de transcriptomas e de genes candidatos potenciais para uso em sistema de RNAi em fungos patogênicos de citros

Resumo

O Brasil é destaque na produção de frutas cítricas, especialmente laranjas, sendo o maior produtor e exportador de suco da fruta. A União Européia é o principal mercado importador do produto brasileiro. No entanto, prejuízos nas exportações da fruta ocorrem por doenças que são quarentenárias A1 nos mercados internacionais de destino, uma dessas é a Mancha Preta dos Citros, causada pelo fungo Phyllosticta citricarpa (Guignardia citricarpa), que promove a depreciação visual da fruta. Graves prejuízos na produção de frutos cítricos são causados pelo fungo Colletotrichum acutatum, um dos causadores da podridão floral, além de provocar queda prematura dos frutos. Extensa quantidade de trabalhos vem sendo desenvolvidos no estudo e controle desses fitopatógenos. Uma abordagem atual e promissora de estudo é a análise de expressão gênica por knockout ou knockdown, via RNA de interfência (RNAi). Esses podem ser encontrados a partir da análise do transcriptoma do organismo em estudo, ou via silenciamento de genes envolvidos com características fenotípicas, causados por inserção de sequências em regiões gênicas expressas. Dessa forma, a utilização de ferramentas com RNAi são de extrema importância no auxílio de estudos de mecanismos envolvidos na patogenicidade de fungos fitopatógenos. Com isso, neste trabalho, objetiva-se a investigação da maquinaria de RNAi no transcriptoma desses fungos. Assim como, a produção de bibliotecas de transformantes randômicos de patogenicidade, e construção e validação de um sistema de transformação para avaliação da expressão de genes candidatos para estudos com RNAi em ambos os fungos.