Silenciamento gênico aplicado ao desenvolvimento de plantas de cana-de-açúcar transgênicas resistentes ao inseto Sphenophorus levis, o bicudo da cana-de-açúcar

Resumo

As larvas do besouro Sphenophorus levis constituem uma das principais pragas das lavouras canavieiras do estado de São Paulo e, até agora, nenhum método de controle tem sido eficiente contra o inseto. Dentro desse contexto, formas de controle se fazem necessárias para minimizar os prejuízos causados por essa praga. Algumas estratégias de controle de insetos baseadas em RNA de interferência têm sido utilizadas para silenciar genes de insetos. Dessa forma, esse projeto de pesquisa pretende desenvolver linhagens de cana-de-açúcar visando a resistência ao bicudo da cana-de-açúcar utilizando o silenciamento gênico. Assim, os objetivos desse projeto são estabelecer o cultivo de S. levis em laboratório, realizar testes de alimentação dos insetos com RNA dupla fita e, transformar linhagens de cana-de-açúcar com construções específicas para a produção de grampos de RNA (dsRNA), visando ativar a maquinaria de silenciamento gênico do inseto quando alimentado com o transgene. As plantas serão transformadas com construções contendo fragmentos dos genes da V-ATPase E e também da serpina 1 de S. levis, utilizando um promotor constitutivo e também um promotor induzível por herbivoria. Durante o desenvolvimento do projeto, em paralelo com a validação do sistema de produção de dsRNA em cana-de-açúcar, novos genes alvo específicos e letais também serão selecionados para testes in vivo, utilizando esses dsRNAs em testes de alimentação. As linhagens de plantas transformadas serão desafiadas para verificar a resistência das mesmas ao ataque do inseto. Assim, esperamos validar o sistema de produção de dsRNA em plantas de cana-de-açúcar visando a resistência ao S. levis para a produção de variedades resistentes à praga, o que deve contribuir para diminuir as perdas do setor em função do ataque do inseto.