Desenvolvimento de modelo de cultura de células 3D de mucosa oral para estudos in vitro

Resumo

Diversos estudos in vitro avaliaram os processos de reparo da mucosa oral. Até o momento, a maioria destes estudos foi realizara utilizando modelos de cultura celular bidimensionais, em que as células são semeadas em monocamada. Estes estudos apresentaram grandes contribuições para a elucidação do comportamento celular em condições fisiológicas e patológicas. Porém, o modelo de cultura celular bidimensional apresenta algumas limitações, como baixa interação celular com a matriz e entre células de diferentes linhagens. Para superar estas limitações, os modelos de cultura tridimensionais foram desenvolvidos, para promover melhor simulação das condições in vivo de interações celulares e expressões fenotípicas. O desenvolvimento e padronização de um modelo tridimensional da mucosa oral contendo tecido epitelial estratificado e tecido conjuntivo celularizado poderia melhorar a compreensão das interações celulares, bem como elucidar a etiopatogênese de diferentes alterações bucais, como a mucosite, melhorando também suas estratégias terapêuticas. O objetivo deste estudo será desenvolver um modelo equivalente 3D de mucosa oral (EPVOME), a partir de uma matriz extracelular (AlloDerm), para estudos in vitro. O desenvolvimento deste modelo, que apresenta morfologia e fenótipo similares a mucosa oral promoverá o uso desta metodologia para diversos estudos envolvendo patologias orais e tratamentos. Queratinócitos orais e fibroblastos serão obtidos de pacientes jovens e saudáveis e a cultura em 3D será obtida utilizando a matriz AlloDerm para o cultivo dos fibroblastos, seguido do cultivo dos queratinócitos. A viabilidade, morfologia e proliferação celulares serão avaliadas pelos testes de MTT, análise histológica em H&E e imunomarcação com PCNA, respectivamente. (AU)