Efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana sobre microcosmos de lesões de cárie em dentina

Resumo

O presente estudo será dividido em duas etapas distintas. A primeira etapa tem por objetivo avaliar o efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT) sobre grupos específicos de microrganismos provenientes de lesão de cárie em dentina. Amostras de dentina infectada serão coletadas de dez crianças com idades entre 7 e 11 anos. As amostras serão utilizadas como inóculo para o crescimento de biofilmes sobre blocos de dentina bovina por 72 h. Em seguida, os biofilmes serão tratados pela associação de curcumina e um LED azul (420 nm) ou de azul de metileno e um LED vermelho (630 nm). A viabilidade de grupos de microrganismos específicos será determinada pelas contagens de unidades formadoras de colônia de microrganismos totais viáveis (Agar Soja Triptona Sangue), estreptococos totais (Agar Mitis Salivarius), estreptococos do grupo mutans (Agar Mitis Salivarius com bacitracina a 0,2%) e lactobacilos (Agar Rogosa com ácido acético glacial a 0,13%). O método de espectrofotometria enzimática será utilizado para avaliar a concentração de L-lactato em meio de cultura. A quantificação de microrganismos totais, estreptococos totais, lactobacilos totais, Prevotella spp., Bifidobacterium spp., Streptococcus mutans, Streptococcus intermedius, Lactobacillus acidophilus, Veillonella spp., Propionibacterium spp. e Actinomyces naeslundii serão realizadas pela técnica de PCR em tempo real. A segunda etapa do estudo avaliará o efeito de protocolos distintos de aPDT sobre a viabilidade de microrganismos localizados em diferentes profundidades de biofilme. Para tanto, biofilmes intactos, submetidos ou não à aPDT, serão corados pela mistura de brometo de etídio e diacetato de fluoresceína e analisados pelo método de microscopia confocal de varredura. A análise estatística será conduzida de acordo com a normalidade e homogeneidade dos dados. Valores de P<0,05 serão considerados significativos. (AU)