Engenharia metabólica da via de ergosterol de Saccharomyces cerevisiae a fim de aumentar a produção do triterpeno friedelina

Resumo

Friedelina é um triterpeno pentacíclico encontrado nas folhas de algumas espécies vegetais como Maytenus ilicifolia. Este composto é biologicamente ativo por si e também é o precursor dos triterpenos quinonametídeos maitenina e pristimerina, importantes como agentes anti-inflamatórios e promissores agentes no tratamento de diferentes tipos de câncer. Entretanto, estes compostos são produzidos apenas na raiz das plantas jovens, o que dificulta a sua obtenção. A partir da molécula de oxidoesqualeno, diferentes vias levam à produção de esteroides de membrana em plantas, fungos e mamíferos, hormônios em plantas e animais ou derivados terpênicos secundários, como o triterpeno friedelina. A friedelina sintase das folhas de M. ilicifolia foi clonada e funcionalmente caracterizada por expressão em Saccharomyces cerevisiae (Processo Fapesp 2011/10379-1). O objetivo deste projeto é de modificar geneticamente a levedura S. cerevisiae a fim de aumentar a produção de friedelina a partir de sua sintase já clonada. O projeto está planejado para ser desenvolvido na Universidade de Tecnologia de Chalmers (Chalmers University of Technology, Gotemburgo, Suécia), no grupo do Professor Jens Nielsen, o qual possui vasta experiência na otimização de modificações genéticas em levedura a fim de alcançar elevadas produções de importantes compostos biotecnológicos. Seu grupo de pesquisa tem desenvolvido modelos de levedura com a função de fábricas sustentáveis de compostos químicos de alto valor como isoprenoides, polímeros e biocombustíveis avançados. Assim, o projeto irá analizar e modificar genes de S. cerevisiae por técnicas de Biologia Sintética aliadas a ferramentas ômicas a fim de expressar o gene clonado de friedelina sintase nas linhagens modificadas e avaliar a produção de friedelina por métodos cromatográficas, avaliando mutações da levedura que possibilitam melhores perfis de produção do composto de interesse. (AU)