Clonagem e caracterização funcional das oxidoesqualeno ciclases de Maytenus ilicifolia

Resumo

Entre os metabólitos secundários produzidos pelas plantas, os isopenoides representam uma classe com diferentes estruturas químicas e variadas atividades biológicas. Friedelina é um derivado triterpênico encontrado nas folhas de algumas espécies como Maytenus ilicifolia, que, além de apresentar atividades biológicas, também é precursora dos quinonametídeos triterpênicos maitenina e pristimerina, promissores agentes terapêuticos no tratamento de diferentes tipos de cânceres, mas produzidos apenas na casca da raiz da planta jovem, o que dificulta a sua obtenção. No intuito de caracterizar as vias metabólicas secundárias de derivados terpênicos e controlar a sua produção, diversas espécies vegetais tiveram os genes de suas terpeno ciclases clonadas. Uma alternativa muito importante para a produção de compostos secundários é a utilização de microrganismos geneticamente modificados. A utilização desses microrganismos evita o extrativismo predatório, emprega menos solventes e, portanto, é uma prática de "química verde", além de possibilitar a manipulação genética para aumento do rendimento e tornar possível uma produção em larga escala. Desta forma, são objetivos deste projeto clonar o gene de friedelina sintase de M. ilicifolia e expressar em Saccharomyces cerevisiae geneticamente modificada para melhor produção do respectivo triterpeno. Assim, o projeto está estruturado de forma a iniciar pela identificação dos transcritos de oxidoesqualeno ciclases das folhas de M. ilicifolia e adequação dos protocolos de clonagem e expressão, partindo para a avaliação da produção de friedelina e outros compostos por métodos cromatográficos, especificidade para o produto friedelina e mutações que possam resultar em melhores perfis de produção de friedelina. (AU)