Função das DNA metiltransferases e caracterização do perfil de metilação do DNA no processo de envelhecimento de abelhas melíferas (Apis mellifera, Apidae, Hymenoptera)

Resumo

A metilação do DNA (DNAm) tem sido apontada como importante modificação epigenética que regula a transcrição gênica de vertebrados, controlando a acessibilidade dos fatores de transcrição aos promotores gênicos através da remodelagem da cromatina. No entanto, esse papel ainda não está bem esclarecido em invertebrados pois ainda são escassos trabalhos que esclareçam os mecanismos moleculares que a DNAm possa controlar na vida dos invertebrados, especialmente os responsáveis pela plasticidade fenotípica/comportamental de alguns insetos socais. Nesse respeito, Apis mellifera, ganhou certo status de organismo modelo devido ao completo set de genes codificadores de DnMTs. Por exemplo, fêmeas de abelhas Apis mellifera podem se diferenciar em rainhas ou operárias a partir de um mesmo genótipo através do regime nutricional a qual as larvas ficam expostos. Um tipo similar de controle nutricional ocorre também na fase adulta desses insetos, proporcionando que rainhas vivam cerca de vinte vezes mais que as operárias, porém, ainda não foram descritos os mecanismos epigenéticos que possam estar envolvidos no processo de envelhecimento das abelhas. Deste modo, este trabalho pretende fornecer pistas sobre o papel da DNAm durante o envelhecimento de rainhas e operárias por meio da quantificação relativa dos transcritos dos genes codificadores das enzimas DNA metiltransferases e ensaios bioquímicos da sua atividade enzimática em rainhas e operárias de diferentes idades de vida adulta. Por meio de bloqueio farmacológico da atividade das DnMTs tentaremos avaliar a participação dessas enzimas no envelhecimento. E finalmente, e dependendo dos resultados obtidos nos experimentos supracitados, tentaremos identificar regiões diferencialmente metiladas entre abelhas com diferentes idades através de uma abordagem RRSB (Reduced Representation Bisulfite Sequencing). (AU)