O uso de TMP sobre enzimas endógenas dentinárias e na biomimetização do substrato dentinário desmineralizado

Resumo

Os ácidos produzidos pelos microrganismos cariogênicos difundem-se pelo tecido dental causando dissolução dos cristais de apatita e ativação de enzimas endógenas capazes de degradar colágeno. Em procedimentos adesivos, esta condição pode prejudicar a qualidade e durabilidade da camada híbrida. Deste modo, considerando uma abordagem biomimética, acredita-se que o trimetafosfato de sódio (TMP) pode ser uma estratégia inovadora para estabilizar e fortalecer a dentina por indução exógena de ligação cruzada do colágeno, pela interação com proteínas não-colagenolíticas e por meio da remineralização. O objetivo deste estudo será investigar a ação do TMP sobre a dentina bovina submetida ao desafio cariogênico artificial, por meio de análises bioquímica e mecânicas. A avaliação do potencial anti-proteolítico do TMP contra MMP-2 e 9 será realizado por meio da análise zimográfica. Para tanto, solução de TMP, concentração a ser definida em estudo piloto, será adicionada no tampão de incubação e, para quantificar a possível inibição das gelatinases, os géis serão escaneados e analisada a intensidade da banda formada por densitometria. Para as análises mecânicas, serão selecionados 50 blocos de dentina radicular bovina (4x6x6mm) com valores de Knoop em torno da média geral de 350KHN (±10%). Posteriormente, os blocos serão divididos em 3 áreas: 1-área controle - sem nenhum tipo de tratamento; 2-área desmineralizada - exposta apenas em solução desmineralizadora, 3-área tratada - área desmineralizada e submetida a uma das soluções de tratamento (TMP, TMP + NaF, TMP + Ca(OH)2, NaF, H2O deionizada/controle negativo) e divididos aleatoriamente em cinco grupos (n=10) de acordo com seus tratamentos. Todas as amostras serão submetidas à ciclagem de pH por meio das soluções de tratamento (10min), solução desmineralizante (4h) e solução remineralizante (8h). Para análise de dureza em profundidade, os blocos serão cortados ao meio e realizada indentações em profundidade (10, 30, 50, 70, 90, 110 e 220µm) utilizando-se um penetrador Knoop (10g/15s) acoplado a um microdurômetro. Para a análise do módulo de elasticidade serão obtidos fragmentos de dentina (0,5x1,7x7,0mm) e desmineralizados previamente em 0,5mL de solução de ácido fosfórico (10%/18h) e submetidos a ciclagem de pH conforme descrito anteriormente, assim como a aplicação dos tratamentos. A análise será por meio de um ensaio de flexão em três pontos usando uma célula de carga de 1N montada em uma máquina de ensaio universal (0,5mm/min). Os valores obtidos serão avaliados quanto a homogeneidade para a determinação dos testes estatísticos mais adequados (p<0.05). (AU)