Modulações epigenéticas e o potencial de auto-renovação de células cancerosas mamárias caninas: a busca por potenciais alvos terapêuticos

Resumo

Neoplasias mamárias, assim como outros tumores sólidos, podem apresentar hierarquia dentre populações de células que determinam o desenvolvimento e o comportamento tumoral. Recentemente, a pesquisa oncológica tem dado ênfase ao estudo de um grupo de células que apresentam características semelhantes as células-tronco de tecidos saudáveis, denominadas Células Iniciadoras de Tumores (CITs). Entre essas características destaca-se a capacidade de auto-renovação das CITs, relevante para a manutenção da heterogeneidade intratumoral das neoplasias sólidas e do desenvolvimento tumoral. Sendo assim, a descoberta e caracterização de moléculas terapêuticas que agem sobre o potencial de auto-renovação das CITs, é de grande relevância para o tratamento do câncer. Neste projeto, o objetivo é avaliar os efeitos da modulação de diferentes alvos epigenéticos sobre o potencial de auto-renovação de cultivos de células oriundos de neoplasias mamárias caninas (NMC) e identificar possíveis regiões regulatórias do potencial de auto-renovação. Para isso, serão avaliados o efeito de doses não-citotóxicas de 23 sondas epigenéticas específicas sob um cultivo celular oriundo de NMC com alto potencial de auto-renovação, determinado através de ensaios de formação de tumoresferas em placas de 24 poços contendo ágar 0,6%. Posteriormente, a molécula epigenética com maior efeito na inibição da capacidade de auto-renovação será determinada e seus efeitos serão avaliados sob abordagens moleculares. Através de análises de expressão gênica global serão identificadas potenciais vias gênicas reguladoras associadas a capacidade de auto-renovação. Após, serão determinados os efeitos da substância epigenética de maior interesse sob o remodelamento de cromatina das tumoresferas através da análise de dados gerados pela técnica ATAC-seq. Finalmente, com a integração dos dados transcriptômicos e epigenômicos, será possível determinar regiões do genoma regulatórias do potencial de auto-renovação, além da caracterização de uma potencial terapia epigenética inovadora contra as CITs e suas características e contra o câncer. (AU)