Avaliação de estimulação de alta frequência na resposta astrocitária in vitro

Resumo

Apesar do uso recorrente, os mecanismos da estimulação de alta frequência (EAF), como utilizado na estimulação cerebral profunda (ECP), mantêm-se desconhecido. Foi demonstrado que a EAF modula diretamente a ativação astrocitária, o que contribui para os efeitos benéficos da EAF. Neste contexto, os astrócitos podem ser considerados os principais responsáveis em promover o amplo aspecto dos efeitos terapêuticos da estimulação. Os astrócitos podem se apresentar com fenótipo neurotóxico ou neurprotetor dependendo da injuria e do microambiente imunológico ou inflamatório.Esses fenótipos são definidos pelo estado de polarização dessas células. Enquanto o subtipo A1 pode ser pro-inflamatório, o subtipo A2 tem sido demonstrado como anti-inflamatório e neuroprotetor. Dado a importância de entender os mecanismos de ação da EAF para melhorar a eficácia terapêutica, assim como o papel relevante dos astrócitos nesta resposta, nós decidimos levantar o seguinte questionamento: A EAF é capaz de alterar o fenótipo astrocitário de neurotoxico e pro-inflamatório (subtipo A1) para um fenótipo anti-inflamatório e neuroprotetor (subtipo A2)? Para testas essa hipótese, iremos avaliar a capacidade da EAF em alterar o fenômeno de polarização de astrócitos in vitro. Primeiramente, os astrócitos serão ativados por TNF-± e então estimulados com EAF a 130 Hz por 1 min. A expressão de mRNA de citocinas, fatores neurotróficos, componente do complemento C3, e a imunofluorescência para GFAP serão avaliados em diferentes tempos após a estimulação. Os resultados destes experimentos irão gerar conhecimento sobre o efeito potencial da EAF no fenótipo astrocitário e podem nos ajudar a descobrir novos alvos para drogas anti-inflamatórias.