Investigação do papel regulador do hormônio concentrador de melanina (MCH) na lactação de ratas Long-Evans: efeitos da inibição do gene Pmch através da técnica de iRNA

Resumo

A síntese do hormônio concentrador de melanina [MCH] na área pré-óptica ventromedial [MPOAvm] aumenta intensamente por volta do 19° dia da lactação de ratas. O papel desta ativação ainda não foi totalmente desvendado, sendo sua função praticamente desconhecida na fisiologia maternal. O MCH é produzido através do processamento do precursor preproMCH [ppMCH], que codifica dois outros neuropeptídeos, o NEI e o NGE. Além disso, a atividade do MCH depende de sua ligação ao seu receptor [MCHR1], que se acopla a diferentes tipos de proteínas G, específicas para cada tipo celular, que podem ativar MAP quinases, diminuir a concentração de AMPc e/ou aumentar a concentração de Ca2+ citossólico. Neste trabalho, propomos a investigação da ativação da expressão de RNAm ppMCH sobre o comportamento maternal e a homeostase energética, através da técnica de interferência de RNA [RNAi], inibindo a expressão do gene Pmch ou a atividade do receptor MCHR1. Paralelamente, será realizada a inibição farmacológica do receptor MCHR1 pelo uso do antagonista competitivo H-6408 [BACHEM, Alemanha]. Serão realizadas injeções intracerebrais na área hipotalâmica lateral [LHA] ou na MPOAvm em ratas lactantes dos devidos RNAs curtos de interferência [siRNAs] e dos controles aleatórios [scrambled]. Em seguida, os encéfalos serão processados para a realização de ensaios bioquímicos e técnicas de identificação neuroquímica como hibridização in situ e imuno-histoquímica, de marcação simples ou dupla. Além disso, as ratas serão filmadas para análise comportamental e parâmetros ligados ao consumo alimentar serão diariamente monitorados. Portanto, este estudo permite uma compreensão mais extensa do sistema peptidérgico do MCH durante o processo da lactação em ratas.