Caracterização de novos elementos regulatórios metagenômicos

Resumo

Compreender a expressão gênica em bactérias é fundamental para entender a lógica de tomada de decisão bacterianas, fornece ferramentas para Biologia Sintética e estudar a regulação da expressão gênica em comunidades microbianas. Em procariotos existem dois principais níveis no controle no início da transcrição. O primeiro são os fatores sigma (Ã) que dão especificidade à RNA polimerase guiando-a para determinados promotores; depois estão os fatores de transcrição (FT) que promovem ou reprimem a transcrição, formando um fino mecanismo de controle. O presente projeto tem como objetivo caracterizar a influência dos sigmas Ã70(RpoD), Ã38(RpoS) e Ã32(RpoH) e dos fatores de transcrição CRP e IHF sobre promotores metagenômicos usando cepas mutantes RpoS, RpoS, RpoH, CRP, IHF e selvagens wtRpoS, wtRpoS wtRpoH, wtCRP, wtIHF. Nossos resultados preliminares indicam que é de fundamental importância que as medições sejam feitas na fase estacionária da curva de crescimento bacteriano para garantir a presenta de Ã38(RpoS), inerente a esse período, bem como impedir viés imposto pela diferença de crescimento das cepas MC4100 (wtRpoH) e K16 (RpoH) antes da fase estacionária (AU)