Haptenos na leishmaniose visceral. Desenvolvimento de ensaios de fase sólida para diagnóstico e sua imunologia em modelos experimentais.

Resumo

A leishmaniose visceral (LV), epidêmica no Brasil, têm sido estudados usando antígenos clássicos ou proteicos em geral. Haptenos são macromoléculas de peso molecular entre 1 e 5 KDa que são compostas por peptídeos, polissacarídeos pequenos e lipídios complexos, e que tem a capacidade de reagir com anticorpos e células imunes de forma incompleta, talvez interferindo na resposta imune. Várias doenças crônicas humanas cursam com altos níveis de anticorpos, mas a mais comum é a LV. Métodos de cromatografia de exclusão molecular permitem separar estas moléculas de extratos brutos de promastigotas, possibilitando sua purificação e caracterização, além de sua associação com moléculas carreadoras e assim uso em ensaios clássicos. Neste projeto, pretendemos estudar a bioquímica e a imunologia de haptenos de extratos brutos de promastigotas e amastigotas axênicos de L. (L.) infantum chagasi por cromatografia de exclusão molecular sequencial. Isto envolve, a: quantificação por dosagem de açucares; b: estudos estruturais por MALDI-TOF e espectrometria de massa; c: identificação e quantificação destes haptenos em urina ou sangue de modelos experimentais; d: determinação de anticorpos específicos por ensaios de fase sólida de captura de anticorpos ou com híbridos seus com proteínas carreadoras em modelos experimentais de hamsteres ou de camundongos BALB/C deficiente geneticamente de ³-interferon; e: estudos de seus efeitos sobre a resposta imune nestes modelos, através de estudos in vivo e in vitro. Isto permitirá determinar se estes haptenos interferem com a resposta imune na LV na imunossupressão e doença visceral e, portanto, com importância clínica e patogenética. (AU)