Avaliação do perfil de microRNA-proteína exossomais em pacientes com hipercolesterolemia familiar

Resumo

A hipercolesterolemia familiar (HF) é um distúrbio hereditário caracterizado por colesterol elevado da lipoproteína de baixa densidade (LDL) e doença cardiovascular prematura, cuja base genética ainda não está totalmente esclarecida. O conteúdo molecular dos exossomos pode ser útil para fins de diagnóstico. Particularmente proteínas e miRNAs foram identificados em exossomos purificados a partir de diferentes fluidos biológicos e podem representar um potencial biomarcador de doenças (fisiopatologia e acompanhamento), incluindo, aquelas relacionadas ao metabolismo do colesterol, como a HF, contribuindo para o diagnóstico e a terapia. O presente estudo tem como objetivo buscar novos alvos moleculares, com base no perfil de miRNA e proteínas exossomais para diagnóstico de HF e prever risco cardiovascular. Para isso, foram selecionados 46 pacientes com HF sem terapia hipolipemiante durante 6 semanas e 46 indivíduos normolipidêmicos (FAPESP # 2016/12899-6). Dados clínicos e amostras de sangue foram obtidos para análises laboratoriais e análise de miRNoma e proteomica de exossomos plasmáticos. A análise global do miRNA foi realizada por sequenciamento (NGS) no IDPC. A análise da proteômica será realizada utilizando espectrômetro de massa Orbitrap Fusion Lumos (Thermo Fisher Scientific) em colaboração com a Dra. Elena Aikawa, onde o estágio de pesquisa no exterior (BEPE) será realizado. As interações biológicas entre os miRNAs diferencialmente expressos e os alvos genéticos que codificam as proteínas estatisticamente aumentadas na HF serão realizadas usando o iCTNet2 no laboratório da Dra. Elena Aikawa. Os resultados do conteúdo molecular dos exossomos, particularmente o perfil de miRNA e protéico, serão essenciais para melhorar o conhecimento do mecanismo molecular relacionado ao desenvolvimento da HF. Além disso, esses resultados contribuirão na busca de novos biomarcadores para o diagnóstico, com alta sensibilidade e reprodutividade, além de novos alvos terapêuticos moleculares. O projeto também será importante para aprimorar o conhecimento da aluna de doutorado e da equipe de pesquisa no Brasil sobre novas tecnologias aplicadas às ferramentas de diagnóstico e análise de bigdata, além de contribuir para o estabelecimento de novas colaborações com um importante centro internacional de pesquisa em cardiologia. (AU)