Estudos mecanísticos da captação e regulação de fosfato: a estreita relação entre um transportador de cassete de ligação de ATP e um sistema dois-componentes

Resumo

Os transportadores ABC são proteínas de membrana envolvidas em uma ampla gama de atividades biológicas, como metabolismo e sinalização celular, adesão, formação de biofilme e patogênese, em células procarióticas e eucarióticas. Entre eles, o PstSCABPhoU, juntamente com o sistema de dois componentes PhoR/PhoB, participa do transporte de fosfato e outros fatores de patogênese em Xanthomonas citri, o agente causal do cancro cítrico. Essa fitopatologia se espalha por culturas cítricas comerciais, gerando grandes perdas na produção agrícola no Brasil e no resto do mundo. Não há controle efetivo da doença, portanto o desenvolvimento de novas estratégias moleculares de inibição do cancro é urgente e essencial. Em nosso laboratório, alcançamos bons progressos na produção, purificação e caracterização de componentes desse complexo. No entanto, os mecanismos sobre como a interação entre esses componentes do PstSCAB-PhoU-PhoR/PhoB permanece incerta. Assim, objetivamos, por aplicação de cristalografia de raios-X e crio microscopia eletrônica de partícula única, resolver as estruturas do complexo e realizar ensaios de interação entre PstSCAB-PhoU, PhoU-PhoR e PhoR-PhoB usando técnicas como o Dicroísmo Circular (CD), espalhamento de raios-X de ângulo a baixo ângulo (SAXS), calorimetria de titulação isotérmica (ITC), termoforese em microescala (MST) e ensaios pull-down. O projeto é altamente viável e se beneficiará da experiência da equipe do LBEA-ICB/USP, juntamente com o Prof. Dr. Albert Guskov, da Universidade de Groningen (Holanda). Temos também o apoio do Prof. Dr. Cristiano Oliveira - Instituto de Física/USP e a infraestrutura do CNPEM através do LNLS, LNBio e LNNano. No geral, esperamos alcançar resultados consistentes que serão impactantes para o desenvolvimento de novas estratégias de controle para o cancro cítrico e outras patologias relacionadas. (AU)