Efeito do status metabólico de vacas de leite nas mudanças epigenéticas no embrião e endometrio e o papel de vesículas extracelulares

Resumo

A redução da fertilidade em vacas de alta produção tem sido um dos principais problemas abordados na Pecuária de leite na ultima década. O Balanço Energético Negativo (BEN) durante o período pós-parto e um fator de risco para que ocorram alterações reprodutivas, tendo significativo impacto econômico devido a redução na produção dos animais. Os metabólitos gerados durante o BEN afetam negativamente as células reprodutivas. No entanto, pouco se sabe a respeito da comunicação intercelular que ocorre no ambiente folicular e uterino de animais acometidos pelo BEN. Vesículas extracelulares (VEs; exossomos e microvesiculas) contendo microRNAs (miRNAs) e proteínas são secretadas pelas células foliculares e uterinas. Por serem mediadoras da comunicação intercelular, as VEs modulam diversos processos reprodutivos e podem carregar sinais moleculares em resposta a fatores estressores como o BEN. Os mecanismos epigenéticos são conhecidos por regular as funções celulares criticas e modular as respostas de adaptação das células, incluindo o metabolismo celular e o estresse. Sendo assim, as alterações epigenéticas devido a exposição a um ambiente estressor podem ser uma das causas dos efeitos negativos observados nas células reprodutivas expostas ao BEN. Portanto, as hipóteses que serão testadas são: as VEs secretadas no ambiente folicular de vacas com BEN afetam a qualidade oocitária, comprometem o desenvolvimento embrionário inicial e modulam mudanças epigenéticas; as VEs secretadas no ambiente uterino de vacas com BEN modulam mudanças epigenéticas e moleculares nas células endometriais. Para testar estas hipóteses o fluído folicular e uterino de novilhas, vacas com alto e baixo BEN serão coletados 30 e 60 dias pós-parto e as VEs serão isoladas e analisadas. Essas VEs isoladas serão adicionadas ao meio de maturação dos oócitos e de cultivo de células endometriais para avaliação dos efeitos nas modulações epigenéticas e moleculares destas células. O primeiro objetivo e investigar as funções das vesículas presentes no fluido folicular de vacas de leite com diferentes status metabólico durante a maturação in vitro de oócitos e no desenvolvimento embrionário inicial, avaliando principalmente as mudanças epigenéticas. O segundo objetivo e determinar o conteúdo das vesículas presentes no fluido uterino de vacas de leite com diferentes status metabólico e investigar as funções dessas vesículas nas células endometriais. Os resultados deste projeto possibilitarão uma maior compreensão de como se encontra o ambiente folicular e uterino de vacas em BEN em dois importantes momentos para a realização da Inseminação Artificial (IA), permitindo assim o desenvolvimento de novas tecnologias e forma de manejo que visem a redução das perdas econômicas na produção de leite. (AU)