Scale up da produção de L-asparaginase empregando microrganismo geneticamente modificado

Resumo

Na área da saúde, este projeto tem uma forte componente de novasbiotecnologias e de soluções avançadas para a produção de produtosbiofarmacêuticos a serem utilizados como agentes terapêuticos em vários tiposde câncer, especificamente, em leucemia. A L-asparaginase (E.C.3.5.1.1)(ASNase) é a enzima que catalisa a reação de hidrólise do grupo amino dacadeia lateral do aminoácido L-asparagina, liberando ácido aspártico e amônia,sendo amplamente utilizada como agente anti-neoplásico. Esta enzima pode serproduzida por uma série de microrganismos, porém, há uma necessidade denovas fontes produtoras com maiores rendimentos e menores efeitos adversos.Assim, o objetivo deste projeto é avaliar a produção de L-asparaginase por umalinhagem de Bacillus subtilis produtora da L-Asparaginase II de Aliivibrio fischeriem agitador rotativo e fazer o scale up do processo para biorreator tanqueagitado. Inicialmente, será realizado um estudo em agitador rotativo avaliando,tempo de indução, concentração do indutor, tamanho do inóculo e tempo decultivo. Paralelamente, serão realizados ensaios de rompimento celular paramelhorar a extração da enzima intracelular. Posteriormente, será feito o scale updo processo para biorreator tanque agitado e serão avaliados alguns parâmetroshidrodinâmicos relacionados ao processo de produção. O desenvolvimento denovas linhas de produção da L-asparaginase e do processo de produção,permitirá obter um terapêutico com maiores rendimentos, mais eficaz e comefeitos colaterais reduzidos.