Busca de inibidores potentes e seletivos da diidroorotato desidrogenase de Mycobacterium tuberculosis (MtDHODH)

Resumo

A tuberculose está entre as dez doenças que mais matam no mundo. Embora tratável, cepas resistentes de Mycobacterium tuberculosis vem se tornando uma séria ameaça à saúde pública. Somente no ano de 2019, por exemplo, foram reportados meio milhão de casos de TB resistentes à rifampicina (RR-TB), medicamento utilizado em combinação com isoniazida, pirazinamida e etambutol para o tratamento da TB. Desses, 78% se mostram TB multirresistente (MDR-TB), considerado multirresistência por apresentar resistência a ambos rifampicina e isoniazida. A enzima diidroorotato desidrogenase (DHODH) presente na Mycobacterium tuberculosis se enquadra nesse cenário como um novo e promissor alvo contra bactérias. DHODH participa do quarto passo da via de síntese de novo de pirimidinas, responsável pela síntese de UMP, precursor de todas as bases pirimídicas (citosina, timina e uracila) e essenciais para a síntese de DNA e RNA. As DHODHs têm sido consideradas o alvo promissor no desenvolvimento de fármacos com atividade anti-inflamatória, imunossupressora, antiproliferativa, antiparasitária, antiviral e bactericida. Propomos aqui inicialmente a caracterização cinética e biofísica da enzima MtDHODH (através das técnicas de DSF e termoforese). Pretendemos desenvolver um protocolo para varredura de ligantes, e a avaliação e caracterização do potencial inibitório e seletivo de bibliotecas de inibidores de DHODHs, através da combinação de ensaios inibitórios e de ligação e a determinação da estrutura dos complexos proteína-ligante através do uso das técnicas de difração de raios-X. Neste projeto pretendemos dar início a avaliação da enzima DHODH de Mycobacterium Tuberculosis (MtDHODH) como alvo para o desenvolvimento de fármacos contra a tuberculose, como etapa crucial dentro da pipeline de descoberta de novos fármacos baseado em alvo. (AU)