Desenvolvimento de produto nanobiotecnológico composto de endolisinas codificadas por bacteriófagos: estratégias em tubos endotraqueais para os controles de biofilme e o risco de infecção

Resumo

Os biofilmes são agentes etiológicos de diversas doenças infecciosas, principalmente àquelas Infecções Relacionadas à Assistência à Saúde (IRAS). Dispositivos odonto-médico-hospitalares ou produtos para saúde (PPS), como os tubos endotraqueais apresentam condições adequadas para formação de biofilme e, consequentemente, o surgimento de infecções, agravando o quadro clínico dos pacientes. O impacto dos biofilmes na saúde tem promovido o desenvolvimento de diferentes abordagens, visando o controle desta fonte de contaminação. Os resultados bem-sucedidos na fagoterapia impulsionam novas pesquisas com bacteriófagos e enzimas codificadas pelos vírus para o controle de biofilmes. No entanto, as evidências científicas da utilização de endolisinas no controle de biofilmes formados por bactérias gram-negativas são escassas devido à dificuldade das enzimas em atravessar a membrana externa da parede celular bacteriana para atuar nos peptideoglicanos. Assim, o objetivo desta proposta de pesquisa será clonar, expressar e purificar as endolisinas dos bacteriófagos vB_PaeM_USP_2 e vB_PaeM_USP_18, os quais apresentam potencial lítico elevado e foram, recentemente, descritos na literatura científica pelo nosso grupo de pesquisa. A potencial aplicabilidade antibacteriana e antibiofilme das enzimas recombinantes associada a nanoestruturas serão avaliadas in vitro e ex vivo contra Pseudomonas aeruginosa. Além disso, um tubo endotraqueal nanobiotecnológico recoberto por endolisinas recombinantes encapsuladas em lipossomas ou nanopartículas poliméricas será investigado in situ e in vivo usando um modelo de formação de biofilme em fluxo contínuo e um modelo animal em ventilação mecânica, respectivamente. Por fim, a ativação da resposta imune inata será avaliada, in vitro, através da resposta de neutrófilos e monócitos na presença das endolisinas recombinantes, visando esclarecer se as formulações nanobiotecnológicas são capazes de ativar resposta imune e se são seguras para uma futura aplicabilidade clínica. (AU)