Desenvolvimento de co-cultura de esferoides pulmonares e cerebrais e organoide cerebral para a avaliação da interação de Cryptococcus sp. e estudo da atividade antifúngica de peptídeos derivados de Galleria mellonella

Resumo

A Criptococose é uma doença infecciosa fúngica, cosmopolita e oportunista grave, de importância na saúde pública que afeta tanto imunocomprometidos quanto imunocompetentes. Os principais agentes etiológicos são o Cryptococcus neoformans e o Cryptococcus gatti que possuem seus nichos ecológicos em excretas de pombos e matéria em decomposição de árvores, tornando sua disseminação constante. A fim de se entender melhor a dinâmica da interação deste fungo, este estudo tem como objetivo estabelecer um modelo de cultura 3D de esferoides cerebral e pulmonar utilizando linhagens de células imortalizadas e organoides originados a partir de células progenitoras neurais. Também será avaliado o potencial antifúngico de peptídeos antimicrobianos produzidos em Galleria mellonella por meio do tratamento das infecções nos modelos tridimensionais determinando-se a Concentração Inibitória Mínima (CIM) e Concentração fungicida mínima (CFM). Para isto, serão utilizadas células U-87 e astrócitos para formação e desenvolvimento dos esferoides cerebrais e células MRC-5 e A549 para o desenvolvimento do esferoide pulmonar. O organoide cerebral será obtido do banco de células ATCC (célula progenitora neural BXS117) que serão analisados quanto a sua formação e caracterizados por técnicas de microscopias. Por sua vez, será realizada a interação entre organoides e fungo com e sem tratamento com peptídeos e será determinada a carga fúngica. Os dados serão analisados estatisticamente