Identificação de vias metabólicas relacionadas com a disfunção endotelial em modelo in vitro de pré-eclâmpsia

Resumo

A pré-eclâmpsia (PE) é uma síndrome específica da gestação humana e os parâmetros clínicos que a definem estão bem esclarecidos. No entanto, diante da gravidade para a mãe e o feto e a confirmação do diagnóstico somente após a vigésima semana de gestação, muitos estudos tem avaliado o uso de biomarcadores, como a razão entre sFlt-1 (receptor solúvel do fator de crescimento endotelial vascular) e PlGF (fator de crescimento placentário) na predição da PE. Esses biomarcadores são duas moléculas pró (PlGF) e anti-angiogênicas (sFlt-1) liberadas pela placenta durante a gestação. Além do balanço angiogênico, outro mecanismo importante nas gestações complicadas por PE é a inflamação persistente no endotélio, que estimula a secreção de vários mediadores inflamatórios, responsáveis pela ativação de diversos padrões de sinalização. Um mediador inflamatório importante é o ácido úrico, que em forma de cristais (urato monossódico - MSU) contribui para a patogenêse da PE através dos seus efeitos inflamatórios. Considerando o desbalanço angiogênico e o estado inflamatório exacerbado em gestantes com PE, o objetivo do projeto será avaliar a ativação das vias metabólicas envolvidas em modelo in vitro (cultura de células endoteliais - HUVEC) de PE e o efeito da incubação com sFLT-1/PlGF e MSU, para confirmar os marcadores de disfunção endotelial e inflamação, o que pode auxiliar na identificação de gestações de alto risco complicadas por PE. Os perfis metabólicos serão determinados através do Seahorse Analyser XE24 (Agilent), avaliando a taxa de consumo de oxigênio e a taxa de acidificação extracelular na presença de moduladores de vias metabólicas específicas (glicólise, beta-oxidação, respiração mitocondrial). A análise estatística univariada será realizada usando o GraphPad Prisma (versão 7.0). Os resultados serão expressos como média e erro padrão da média (SEM). Os resultados serão avaliados por testes paramétricos ou não paramétricos, dependendo da variabilidade, sendo adotado o nível de significância de p<0,05. Estudos sobre disfunção endotelial e sua relação com a inflamação na PE ainda permanecem um objetivo a ser mais explorado. Assim, elucidar os mecanismos moleculares e metabólicos associados às interações entre inflamação e disfunção endotelial pode ser favorável para desenvolver novos tratamentos e terapias mais efetivas. A análise dos parâmetros metabólicos poderá fornecer informações não identificadas pelos diagnósticos tradicionais e com potencial biomarcador futuro. (AU)