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(Referência obtida automaticamente do Web of Science, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores.)

Exploring structural aspects of the human Golgi matrix protein GRASP55 in solution

Texto completo
Autor(es):
Thirupathi Reddy, S. [1] ; Santos Mendes, Luis Felipe [1] ; Fontana, Natalia Aparecida [1] ; Costa-Filho, Antonio Jose [1]
Número total de Autores: 4
Afiliação do(s) autor(es):
[1] Univ Sao Paulo, Dept Phys, Ribeirao Preto Sch Philosophy Sci & Literature, Av Bandeirantes 3900, BR-14040901 Ribeirao Preto, SP - Brazil
Número total de Afiliações: 1
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: International Journal of Biological Macromolecules; v. 135, p. 481-489, AUG 15 2019.
Citações Web of Science: 0
Resumo

In mammals, the Golgi apparatus is the central hub for intracellular trafficking, sorting and post-translational modifications of proteins and lipids. Golgi reassembly and stacking proteins (GRASPs) are somehow involved in Golgi stacking, which is relevant for its proper function, and also in unconventional protein secretion. However, the structural details on how GRASPs accomplish those tasks are still elusive. Here, we have explored the biochemical and biophysical properties of human full-length GRASP55 in solution. Sequence-based analyses and circular dichroism spectroscopy suggest that GRASP55 presents multiple intrinsically disordered sites, although keeping considerable contents of regular secondary structure. Size exclusion chromatography and multiple-angle light scattering show that GRASP55 are monomers in solution. Urea denaturation of GRASP55 suggests the transition to the unfolded state is a cooperative process. Differential scanning calorimetry analysis displays two endothermic transitions for GRASP55, indicating the existence of an intermediate state prior to unfolding. Thioflavin T fluorescence suggests GRASP55 intermediate can be aggregates/fibrils. Transmission electron microscopy and fluorescence lifetime imaging microscopy prove GRASP55 forms large amorphous aggregates but not amyloid-like fibrils in the intermediate state. These results could be helpful in discussing the proper function of human GRASP55 in the Golgi organization as well as unconventional secretion of proteins. (C) 2019 Elsevier B.V. All rights reserved. (AU)

Processo FAPESP: 16/23863-2 - Interações moleculares da proteína de organização e compactação do Golgi (GRASP) de Saccharomyces cerevisiae
Beneficiário:Natália Aparecida Fontana
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
Processo FAPESP: 17/12146-0 - Explorando as propriedades biofísicas da proteína humana de organização e compactação do Golgi (GRASP55) e suas interações com modelos de membrana
Beneficiário:Thirupathi Reddy Soudherpally
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 17/24669-8 - Desvendando as bases moleculares de processos iniciais da secreção de proteínas em humanos utilizando técnicas biofísicas
Beneficiário:Luis Felipe Santos Mendes
Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Processo FAPESP: 15/16812-0 - EMU concedido no processo 2014/15546-1: SEC-MALS
Beneficiário:Richard Charles Garratt
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Programa Equipamentos Multiusuários
Processo FAPESP: 15/50366-7 - Resolving mechanistic details of peptide transport across membranes using crystallographic and non-crystallographic structural biology approaches
Beneficiário:Antonio José da Costa Filho
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
Processo FAPESP: 12/20367-3 - Estudos estruturais e funcionais da proteína de organização e compactação do Golgi (GRASP) de Cryptococcus neoformans
Beneficiário:Antonio José da Costa Filho
Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular