MAMP-triggered Medium Alkalinization of Plant Cell Cultures

Autor(es)

Fiorin, Gabriel L. ^{[1, 2, 3]} ; Sanchez-Vallet, Andrea ^{[3, 4]} ; Thomma, Bart P. H. J. ^[3] ; Pereira, Goncalo A. G. ^[2] ; Teixeira, Paulo J. P. L. ^[5]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Univ Estadual Campinas, Grad Program Genet & Mol Biol, Campinas - Brazil

^[2] Univ Estadual Campinas, Lab Genom & Expressao, Campinas - Brazil

^[3] Wageningen Univ & Res, Lab Phytopathol, Wageningen - Netherlands

^[4] Swiss Fed Inst Technol, Inst Integrat Biol, Plant Pathol, Zurich - Switzerland

^[5] Univ Sao Paulo, Escola Super Agr Luiz de Queiroz ESALQ, Dept Ciencias Biol, Lab Genet & Imunol Plantas, Piracicaba - Brazil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: BIO-PROTOCOL; v. 10, n. 8 APR 20 2020.
• Citações Web of Science: 0

Resumo

Plants recognize a wide variety of microbial molecules to detect and respond to potential invaders. Recognition of Microbe-Associated Molecular Patterns (MAMPs) by cell surface receptors initiate a cascade of biochemical responses that include, among others, ion fluxes across the plasma membrane. A consequence of such event is a decrease in the concentration of extracellular H+ ions, which can be experimentally detected in plant cell suspensions as a shift in the pH of the medium. Thus, similarly to reactive oxygen species (ROS) accumulation, phosphorylation of MAP kinases and induction of defense-related genes, MAMP-induced medium alkalinization can be used as a proxy for the activation of plant immune responses. Here, we describe a detailed protocol for the measurement of medium alkalinization of tobacco BY-2 cell suspensions upon treatment with two different MAMPs: chitohexamers derived from fungal cell walls (NAG6; N-acetylglucosamine) and the flagellin epitope flg22, found in the bacterial flagellum. This method provides a reliable and fast platform to access MAMP-Triggered Immunity (MTI) in tobacco cell suspensions and can be easily adapted to other plant species as well as to other MAMPs. (AU)

• Processo FAPESP: 13/09878-9 - Caracterização funcional de uma quitinase do fungo Moniliophthora perniciosa com possível papel na patogenicidade sobre o cacaueiro durante a doença vassoura de bruxa
• Beneficiário: Gabriel Lorencini Fiorin
• Linha de fomento: Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Iniciação Científica
• Processo FAPESP: 09/51018-1 - Construção de um atlas transcriptômico para o estudo da doença vassoura-de-bruxa do cacaueiro
• Beneficiário: Paulo José Pereira Lima Teixeira
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Doutorado Direto
• Processo FAPESP: 09/50119-9 - Estudo integrado e comparativo de três doenças fúngicas do cacau: vassoura-de-bruxa, monilíase e mal do facão, visando à compreensão de mecanismos de patogenicidade para o desenvolvimento de estratégias de controle
• Beneficiário: Gonçalo Amarante Guimarães Pereira
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Processo FAPESP: 11/23315-1 - Caracterização funcional de uma quitinase do fungo Moniliophthora perniciosa com possível papel na patogenicidade sobre o cacaueiro durante a doença vassoura de bruxa.
• Beneficiário: Gabriel Lorencini Fiorin
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
• Processo FAPESP: 14/06181-0 - Estabelecimento de uma metodologia baseada no sistema CRISPR/Cas9 para manipulação genética do fungo Moniliophthora perniciosa, causador da vassoura de bruxa do cacaueiro
• Beneficiário: Gabriel Lorencini Fiorin
• Linha de fomento: Bolsas no Brasil - Mestrado