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Synthetic and minimalist vectors for Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation of fungi

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Autor(es):
Nora, Luisa Czamanski ; Goncales, Relber Aguiar ; Martins-Santana, Leonardo ; Ferreira, Beatriz Henriques ; Rodrigues, Fernando ; Silva-Rocha, Rafael
Número total de Autores: 6
Tipo de documento: Artigo Científico
Fonte: GENETICS AND MOLECULAR BIOLOGY; v. 42, n. 2, p. 4-pg., 2019-04-01.
Resumo

We present a collection of minimalist binary vectors for transformation through ATMT applicable to several fungi species. pLUO plasmid binary vectors consist of a reporter module containing fluorescent proteins, mCherry or eGFP, flanked by a multiple cloning site and a transcription terminator site. They also present a synthetic gene allowing resistance to Hygromicin B flanked by alternate promoters, one for yeast and another for filamentous fungi. Left and right borders were added for Agrobacterium tumefaciens recognition, and a minimal broad-host range RK2 replication origin. Transformation was validated in the pathogenic fungus Paracoccidioides lutzii. Hence, we developed an efficient and reliable molecular tool for fungal transformation: minimalist, synthetic, modular, and available in four different versions, and these can still be readily modified using a few primers and few cloning steps. (AU)

Processo FAPESP: 12/22921-8 - Abordagens de biologia sintética para decifrar os mecanismos de integração de sinais em promotores bacterianos complexos
Beneficiário:Rafael Silva Rocha
Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
Processo FAPESP: 16/03763-3 - Desvendando os mecanismos de regulação gênica a nível de células únicas em Trichoderma reesei
Beneficiário:Luísa Czamanski Nora
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 16/01946-3 - Construção de promotores sintéticos para expressão de celulases usando novos elementos cis-regulatórios em Trichoderma reesei
Beneficiário:Leonardo Martins Santana
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Mestrado
Processo FAPESP: 14/22561-7 - Superexpressão da paracoccina: fenótipo e virulência de linhagens de Paracoccidioides brasiliensis
Beneficiário:Relber Aguiar Gonçales
Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado