Validação comparativa utilizando PCR quantitativo em tempo real (qPCR) e PCR convencional de sêmen bovino centrifugado em gradiente de densidade contínuo

Autor(es)

Resende, M. V. ^[1] ; Lucio, A. C. ^[2] ; Perini, A. P. ^[1] ; Oliveira, L. Z. ^[1] ; Almeida, A. O. ^[1] ; Alves, B. C. A. ^[3] ; Moreira-Filho, C. A. ^[4] ; Santos, I. W. ^[5] ; Hossepian de Lima, V. F. M. ^[1]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] UNESP, FCAV, Dept Med Vet Prevent & Reprod Anim, Jaboticabal, SP - Brazil

^[2] UNESP, FCAV, Dept Zootecnia, Jaboticabal, SP - Brazil

^[3] Inst Israelita Ensino & Pesquisa Albert Einstein, Sao Paulo - Brazil

^[4] Univ Sao Paulo, Fac Med, Dept Pediat, BR-09500900 Sao Paulo - Brazil

^[5] UFPR, Dept Vet Med, Palotina, Parana - Brazil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Arquivo Brasileiro de Medicina Veterinária e Zootecnia; v. 63, n. 3, p. 544-551, JUN 2011.
• Citações Web of Science: 1

Resumo

O objetivo do presente estudo foi determinar o enriquecimento de espermatozoides portadores do cromossomo X após a centrifugação em gradiente de densidade contínuo de Percoll ou OptiPrep, utilizando reação em cadeia da polimerase quantitativa em tempo real (qPCR) do DNA do espermatozoide e dos embriões bovinos produzidos in vitro resultantes pela PCR convencional. Espermatozoides descongelado foram depositados em gradientes de densidade e os tubos foram centrifugados. Os sobrenadantes foram gentilmente aspirados e os espermatozoides recuperados do fundo dos tubos. As taxas de clivagem e de blastocisto foram determinadas pela produção in vitro de embriões e a PCR foi realizada para a identificação genética do sexo dos embriões. Verificou-se diferença na taxa de blastocistos entre os grupos Percoll e OptiPrep (P<0,05). A porcentagem de embriões de fêmeas nos grupos Percoll e OptiPrep foi de 62,0% e 47,1%, respectivamente. Estes resultados foram confirmados pela qPCR do DNA de espermatozoides e uma subestimação foi observada no grupo do gradiente de densidade de Percoll. Foi possível a sexagem de espermatozoides utilizando uma metodologia simples. (AU)

• Processo FAPESP: 04/06044-0 - Inovação incremental no processo de seleção do sexo de espermatozoides bovinos por centrifugação em gradiente de densidade vidando facilitar a implementação em escala em empresas de congelação de sêmen e produção in vitro de embriões
• Beneficiário: Max Vitória Resende
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado
• Processo FAPESP: 05/59357-9 - Inovacoes incrementais no processo de selecao do sexo de espermatozoides bovinos por centrifugacao em gradiente de densidade.
• Beneficiário: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular