Estabelecimento de um protocolo para obtenção de linhagens de células-tronco neuronais a partir do epitélio olfatório de cães

Autor(es)

Alves, Flavio R. ^[1] ; Guerra, Ricardo R. ^[2] ; Fioretto, Emerson T. ^[3] ; Delgado, Juliana C. ^[4] ; Machado Junior, Antonio A. N. ^[1] ; Ambrosio, Carlos E. ^[5] ; Kerkis, I. ^[6] ; Miglino, Maria A. ^[4]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] UFPI, Curso Med Vet, Disciplina Diagnost Imagem, BR-64900000 Bom Jesus, PI - Brazil

^[2] Univ Fed Paraiba, Ctr Ciencias Agr, Dept Ciencias Vet, BR-58397000 Areia, PB - Brazil

^[3] Univ Fed Sergipe, Ctr Ciencias Biol & Saude, Dept Morfol, Lab Biol Celular & Estrutural, BR-49100000 Sao Cristovao, SE - Brazil

^[4] Univ Sao Paulo, Dept Cirurgia, FMVZ, BR-05508270 Sao Paulo - Brazil

^[5] Univ Sao Paulo, FZEA, Dept Ciencias Basicas, BR-13635270 Pirassununga, SP - Brazil

^[6] Inst Butantan, Genet Lab, BR-05503900 Sao Paulo - Brazil

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Pesquisa Veterinária Brasileira; v. 30, n. 4, p. 363-372, APR 2010.
• Citações Web of Science: 5

Resumo

Foi realizado um estudo morfológico e por cultivo celular a partir de células provenientes da mucosa olfatória de cães, como forma de estabelecer um protocolo de cultivo, como uma proposta para o tratamento de lesões traumáticas e nervosas degenerativas nestes animais e futuramente, para que tais resultados possam ser aplicados a espécie humana. Foram utilizados doze cães sem raça definida, a termo, oriundos de castrações do Centro de Controle de Zoonoses de São Paulo. O tecido da lâmina cribiforme do etmóide dos fetos foi coletado sob necropsia, em condições estéreis, 1 a 2 horas post mortem, por meio de incisão uterina e acesso da região fetal supracitada. Depois as células isoladas desse tecido foram adicionadas em médio DMEM/F-12 sob condições padrão (5% CO2, >37ºC). As células obtidas a partir de biópsias do epitélio olfatório de cães apresentaram rápido crescimento após 24 horas de cultivo, demonstrando morfologia esférica, sendo encontradas flutuando ao redor do fragmento aderido à garrafa de cultura. Após 20 dias, foram verificados tipos celulares específicos, predominantemente elipsóides ou fusiformes, foram observadas in vitro. Sob avaliação por imunofluorescência indireta observaram-se células com expressão positiva para marcadores de precursores neuronais (GFAP, Neurofilamentos, oligodendrócitos e â-tubulina III). O índice de proliferação celular mostrou-se positivo para Ki67 com uma tendência de marcação de grupos celulares ao longo da região apical, enquanto a imunomarcação para PCNA mostrou-se predominantemente em grupos celulares residentes sobre a lâmina basal. A microscopia eletrônica de transmissão do epitélio olfatório de cães revelou células com citoplasma eletrodenso e mesma distribuição das células marcadas positivamente para PCNA. A atividade metabólica foi confirmada pela presença de eucromatina em muitas regiões celulares. Todos estes aspectos sustentam a hipotese sobre a presença de células progenitoras residentes entre as células basais do epitélio olfatório comprometidas com a renovação desse epitélio, particularmente a população de neurônios. (AU)

• Processo FAPESP: 05/57787-6 - Avaliacao da cultura de celulas-tronco do epitelio olfatorio de caes sem raca definida (canis familiaris linnaeus, 1758).
• Beneficiário: Flavio Ribeiro Alves
• Modalidade de apoio: Bolsas no Brasil - Doutorado