Protocolo da extração de DNA de material parafinado para análise de microssatélites em leiomioma

Autor(es)

Ericson Martins Nascimento ^[1] ; Marilda Osti Spinelli ^[2] ; Consuelo Junqueira Rodrigues ^[3] ; Nilo Bozzini ^[4]

Afiliação do(s) autor(es)

^[1] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. Departamento de Cirurgia

^[2] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. Departamento de Cirurgia

^[3] Universidade de São Paulo. Faculdade de Medicina. Departamento de Cirurgia

^[4] Hospital das Clínicas de São Paulo. Serviço de Ginecologia e Obstetrícia

• Tipo de documento: Artigo Científico
• Fonte: Jornal Brasileiro de Patologia e Medicina Laboratorial; v. 39, n. 3, p. 253-255, 2003-09-00.

Resumo

É apresentada a padronização de protocolo de extração de DNA de material parafinado para análise da instabilidade de microssatélites de genes relacionados ao leiomioma uterino, utilizando-se 30mg a 40mg de tecido retirado de blocos de parafina. Os blocos são desparafinizados por banhos de xilol a 65ºC, reidratados com soluções de concentrações decrescentes de ETOH e água deionizada. A extração de DNA é obtida através das etapas de lise celular, com solução Promega, digestão de proteínas por proteinase K, precipitação com proteínas com solução Promega e precipitação do DNA com ETOH 70% gelado e ressuspendido com solução Promega. Este protocolo resulta em um DNA viável para uso na reação em cadeia da polimerase (PCR). (AU)

• Processo FAPESP: 01/14052-5 - Influencia da instabilidade de microsatelites do leiomioma uterino na resposta a administracao de analogo do gnrh.
• Beneficiário: Consuelo Junqueira Rodrigues
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular