Influência de periodontopatógenos na expressão do peptídeo antimicrobiano LL37 em tecido gengival e neutrófilos de indivíduos saudáveis ou com doença periodontal

Resumo

Peptídeos antimicrobianos humanos, como o LL37, apresentam um amplo espectro de atividade contra bactéria Gram-positivas, Gram-negativas, fungos e vírus envelopados, deste modo, representam um importante mecanismo de defesa contra a invasão de microrganismos patogênicos. Os objetivos deste trabalho são avaliar os níveis de LL37 no tecido gengival e em cultura de neutrófilos do sangue periférico humano estimuladas com bactérias periodontopatogênicas e alguns de seus fatores de virulência, bem como analisar a expressão de RNAm para esse peptídeo nessas células. Voluntários com periodonto saudável ou com doença periodontal serão inicialmente selecionados e terão amostras do tecido gengival e sangue periférico coletados. Os níveis da catelicidina LL37 no tecido gengival serão avaliados através do método de ELISA utilizando um peptídeo sintético produzido e anticorpos policlonais específicos. Adicionalmente, para examinar se as bactérias afetam a expressão e produção de LL37 por neutrófilos, estas células serão estimuladas com uma bateria de bactérias orais e alguns de seus fatores de virulência em vários períodos de tempo. O sobrenadante das culturas será submetido a ELISA para quantificação de LL37 e o RNA, extraído do pellet celular, será utilizado para quantificação de RNAs mensageiros para a catelicidina, através da técnica de reação em cadeia de polimerase em tempo real (Real Time-PCR).