Análise in situ e in vitro do óxido nítrico, apoptose e biogênese mitocondrial nas doenças mitocondriais e em linhagem de mioblastos C2C12

Resumo

As Doenças Mitocondriais (DM) são um grupo heterogêneo de doenças caracterizadas por alterações do metabolismo mitocondrial que resultam, principalmente, em disfunção do sistema nervoso e muscular. Na biópsia de músculo destes pacientes, geralmente, existe uma modificação histológica que se caracteriza pela acumulação de mitocôndrias estruturalmente anormais na fibra muscular (fibras ragged red - RRF). Este aumento no tamanho e número mitocondrial trata-se, de certa forma, de uma tentativa de compensar a insuficiência funcional mitocondrial, no entanto, não se sabe qual mecanismo é o responsável por esse aumento e acúmulo de mitocôndrias. Alguns estudos mostram que o Óxido Nítrico (NO) está relacionado com biogênese mitocondrial em diversos tipos celulares e pode influenciar na apoptose desencadeada por fatores mitocondriais. Além disso, outros estudos mostraram um aumento da apoptose nas RRF de pacientes com DM. No entanto, nenhum estudo anterior mostra a relação entre NO, proliferação mitocondrial e apoptose em pacientes com DM. Um estudo abrangendo a análise integrada desses fatores é importante, pois existem estratégias terapêuticas (terapia com exercício e administração de L-arginina - precursor de NO) que são aplicadas nesses pacientes e influenciam nesses fatores apesar de não se ter um conhecimento prévio mais aprofundado a respeito. Neste projeto será feita a análise in situ das fibras de biópsia de músculo de pacientes com DM segundo: a atividade de Oxido Nítrico Sintase (NOS) na região sarcolemal, função e proliferação mitocondrial (COX e SDH) e apoptose. Além disso, será feita a análise in vitro do tratamento de cultura de mioblastos (C2C12) com doador de NO, antagonista de NOS e L-arginina (precursor de NO) e sua relação com o conteúdo e função mitocondrial. (AU)