Caracterização estrutural e funcional das isoformas da enzima fumarato hidratase de Trypanosoma cruzi

Resumo

Em 2009, a sociedade de um modo geral, e, em especial, a comunidade científica, comemoram o centenário da descoberta da Doença de Chagas. Aliado à celebração do trabalho desenvolvido pelo sanitarista Carlos Chagas, que identificou o agente etiológico e o vetor da doença, o ano de 2009 também registra uma triste estatística: 16 a 18 milhões de pessoas estão infectadas pelo parasito e cerca de 25% da população da América Latina corre o risco de contraí-lo. Apesar de existirem esforços para desenvolver um tratamento específico e eficaz, um século se passou e até então nenhuma terapia promissora foi desenvolvida. Diante disso, várias são as abordagens para compreender os mecanismos, pelos quais, o T. cruzi sobrevive no homem, e uma nova estratégia para o desenvolvimento de novos fármacos se baseia na identificação de vias metabólicas ou enzimas específicas essenciais para a sobrevivência do parasito. Dentro desse contexto, o presente projeto foca o estudo da enzima fumarato hidratase (fumarase) que catalisa a hidratação reversível de fumarato em malato. Estudos recentes em tripanosomatídeos, utilizando Trypanosoma brucei como modelo, sugerem que nesses parasitos, as isoformas das fumarases são encontradas em compartimentos celulares como mitocôndria, citosol e possivelmente no glicossomo. Além disso, estes estudos indicam que a classe das fumarases é essencial para a sobrevivência desse protozoário. Como uma importante contribuição para o entendimento do papel desta classe de enzimas em tripanosomatídeos, nosso projeto visa a obtenção de nocautes das fumarases em T. cruzi, a localização celular, bem como a clonagem, expressão, purificação e caracterização estrutural das isoformas citosólica e mitocondrial da enzima fumarato hidratase de Trypanosoma cruzi. A produção heteróloga e o mapeamento estrutural das enzimas FH de Trypanosoma cruzi aqui propostos serão, em etapas futuras, utilizados para a validaçao de FH como potencial alvo para o planejamento de inibidores como uma importante ferramenta no combate à Doença de Chagas. (AU)