EMU: produção de modelos murinos para o estudo funcional de células tronco normais e do câncer e análise comparativa do transcriptoma e do proteoma destas células e de sua progênie

Resumo

Devido a sua semelhança com as células tronco hematopoéticas (CTHs), células progenitoras imaturas, presentes nos tumores malignos e leucemias foram denominadas de células tronco do câncer (CTCs). As CTCs são capazes de se dividirem de forma assimétrica originando células tumorais mais diferenciadas ou células filhas idênticas. Enquanto as primeiras constituem a maior parte da massa tumoral, as CTCs são responsáveis pela manutenção/recaída da doença pois são capazes de repopular a massa tumoral após a quimioterapia. Graças ao status quiescente, as CTCs são intrinsecamente resistentes à ação das drogas convencionalmente usadas no tratamento anticâncer. A identificação das CTCs baseia-se em ensaios funcionais, sendo o modelo mais utilizado o transplante em camundongos imunodeficientes. Embora na literatura a existência de CTCs tenha sido demonstrada em diferentes doenças malignas, a natureza destas células permanece elusiva. O presente projeto objetiva combinar ensaios in vivo (usando animais imunodeficientes, geneticamente manipulados e/ou letalmente irradiados) com métodos de análise do transcriptoma e do proteoma para o estudo de diferentes células tronco. Cinco grandes projetos (representando mais de 30 subprojetos) serão desenvolvidos: a) Identificação da subpopulação de células com características de CTC nas leucemias associadas as proteínas híbridas CALM-AF1 O e PML-RARA usando modelos murinos; b) Identificação das vias de sinalização com atividade aberrante nas CTCs e na sua progene em leucemias agudas e carcinomas de mama; c) Análise do efeito do bloqueio do gene HIF-1A pelo Topotecan em linhagens celulares de glioblastoma multiforme in vitro e em camundongos com imunodeficiência combinada após radiação ionizante; d) Estudo das CTHs e dos precursores hematopoéticos de camundongos com inativação do gene Dkc (modelo de disceratose congênita) e que apresentam alteração da função ribossomal e propensão ao desenvolvimento de neoplasias. d) Determinação em modelos animais da eficiência regenerativa de CT pluripotentes induzidas (iPS) por meio de vetores retrovirais; e) Identificação de vias envolvidas no controle da quiescência, apoptose e diferenciação destas iPS. (AU)