Estratégias tolerogênicas antígeno-específicas visando profilaxia e terapia na artrite autoimune experimental.

Resumo

A artrite reumatóide (AR) é uma doença inflamatória crônica de caráter autoimune que compromete as articulações. A maioria das terapias aprovadas para tratamento desta e outras patologias autoimunes é baseada na inibição global da resposta imune, o que aumenta a susceptibilidade aos agentes infecciosos. O objetivo geral deste projeto é definir uma estratégia tolerogênica específica que sirva tanto como medida profilática quanto terapêutica. Para isto, será utilizado o modelo de artrite experimental obtido pela imunização de camundongos BALB/c com proteoglicano (PG). Inicialmente, serão testados quatro protocolos de indução de tolerância específica. Para isto, os animais serão imunizados com o antígeno específico (PG) na presença de vitamina D3, dexametasona, aspirina e rapamicina, e posteriormente submetidos a uma avaliação quanto sua eficácia tolerogênica. O protocolo que determinar o efeito tolerogênico mais eficaz será utilizado para a realização das etapas subseqüentes que incluem a avaliação do potencial profilático e terapêutico. O potencial profilático desta estratégia será avaliado após a indução da artrite, antes do desenvolvimento da doença, e o seu potencial terapêutico será avaliado após o aparecimento das primeiras manifestações clínicas da artrite (eritema e edema nas articulações). A resposta imune humoral (anticorpos específicos e fator reumatóide), celular sistêmica (linfonodos e baço) e local (articulação) serão também avaliadas nos protocolos de profilaxia e terapia. A resposta imune humoral será avaliada pela detecção de anticorpos anti-PG. A caracterização da resposta imune sistêmica será realizada pelo perfil de produção das citocinas (IL-1, IL-4, IL-6, TNF-alfa, IFN-gama, IL-10, IL-17) pelo baço e linfonodos e pela caracterização das populações celulares (Th1, Th2, Th17, Treg e células dendríticas) presentes nestes órgãos. A quantificação das citocinas será feita por ELISA de captura e das populações celulares por citometria de fluxo. A resposta imune celular local será igualmente determinada por avaliação da produção de citocinas e caracterização das diferentes populações celulares. Este perfil imunológico será definido por PCR em tempo real a partir de RNA obtido das lesões articulares.