Resposta imune celular in vitro em indivíduos infectados pelo hiv-1 induzida por células dendríticas que expressam o fator ciita e a proteína gag de hiv-1 fusionada à dc-lamp

Resumo

A infecção pelo Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV) leva a um profundo comprometimento do sistema imunológico, principalmente devido à destruição maciça de linfócitos T CD4+. Recentemente, diversos trabalhos vêm demonstrando o uso potencial de utilização de células dendríticas (DCs) em estratégias terapêuticas para estimular a imunidade celular contra o HIV. Neste projeto, pretendemos avaliar o potencial de células dendríticas derivadas de monócitos de indivíduos infectados pelo HIV, transduzidas ex vivo com vetor lentiviral, em estimular resposta imune celular in vitro. O vetor lentiviral será constituído por uma sequência otimizada para expressão em células humanas, que codifica para a co-expressão da proteína Gag fusionada à DC-LAMP e o fator de co-ativação transcricional CIITA. A expressão de Gag fusionada à DC-LAMP permitirá seu direcionamento para a apresentação antigênica via moléculas do MHC II, cuja expressão será aumentada através do estímulo pelo fator CIITA. As DCs transduzidas serão avaliadas quanto à expressão do antígeno vacinal, do fator CIITA e das moléculas do MHC, e quanto à maturação celular e produção de citocinas. Em seguida, estas células serão co-cultivadas com linfócitos autólogos, os quais serão avaliados através da produção de IFN-³, TNF-±, mip-1², IL-2 e ativação de linfócitos T citotóxicos. A expectativa é que esta nova estratégia vacinal potencialize a capacidade das DCs em ativar uma resposta de linfócitos T específica contra o HIV.