Caracterização funcional e localização intracelular de componentes do sistema antioxidante mitocondrial e nuclear do Trypanosoma cruzi dependentes ou não da tripanotiona

Resumo

Dentre as proteínas do sistema antioxidante do Trypanosoma cruzi, as triparedoxinas peroxidase citosólica e mitocondrial (TcMPx) desempenham um importante papel na sua viabilidade e virulência. O sistema antioxidante citosólico foi elucidado, mas não se sabe como o sistema mitocondrial dependente da TcMPx atua. Análise de bioinformática, experimentos de imunolocalização e de bioenergética mitocondrial realizados pelo nosso grupo, sugerem que a TcMPx esteja localizada no citosol e na membrana mitocondrial, o que permitiria a sua interação com o sistema citosólico dependente da tripanotiona. Adicionalmente, uma banda mais pesada (aproximadamente 28kDa) foi detectada por immunoblotting sendo mais expressa em condições de estresse oxidativo. Até o momento, a possibilidade da existência de um sistema antioxidante nuclear nunca foi abordada. Nosso grupo identificou a triparedoxina II (TcTPNII) na região perinuclear, mas não se conhece com quem ela interage. Esse projeto de pesquisa tem por objetivos determinar a exata localização intracelular da TcMPx, seu interatoma, sua possível migração em condição de estresse oxidativo, especificar qual domínio está voltado para o citosol e sequenciar a proteína de aproximadamente 28kDa. Além disso, determinar o interatoma da TcTPNII e sua localização intracelular nas diferentes formas de T. cruzi. A contribuição da mitocôndria para a sobrevivência do parasita tratado com H2O2 ou agentes genotóxicos será bordada. Os resultados obtidos esclarecerão as estratégias utilizadas pelo parasita para detoxificar os hidroperóxidos e permitirá a identificação de novos alvos que poderão levar ao desenvolvimento de uma terapia mais específica. (AU)