Caracterização funcional e localização intracelular de componentes do sistema antioxidante mitocondrial e nuclear do Trypanosoma cruzi dependentes ou não da tripanotiona

• Processo: 11/20084-9
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de fevereiro de 2012 - 31 de julho de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica
• Pesquisador responsável: Fernanda Ramos Gadelha
• Beneficiário: Fernanda Ramos Gadelha
• Instituição-sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Assunto(s): Proteínas Antioxidantes Espécies de oxigênio reativas Trypanosoma cruzi

Resumo

Dentre as proteínas do sistema antioxidante do Trypanosoma cruzi, as triparedoxinas peroxidase citosólica e mitocondrial (TcMPx) desempenham um importante papel na sua viabilidade e virulência. O sistema antioxidante citosólico foi elucidado, mas não se sabe como o sistema mitocondrial dependente da TcMPx atua. Análise de bioinformática, experimentos de imunolocalização e de bioenergética mitocondrial realizados pelo nosso grupo, sugerem que a TcMPx esteja localizada no citosol e na membrana mitocondrial, o que permitiria a sua interação com o sistema citosólico dependente da tripanotiona. Adicionalmente, uma banda mais pesada (aproximadamente 28kDa) foi detectada por immunoblotting sendo mais expressa em condições de estresse oxidativo. Até o momento, a possibilidade da existência de um sistema antioxidante nuclear nunca foi abordada. Nosso grupo identificou a triparedoxina II (TcTPNII) na região perinuclear, mas não se conhece com quem ela interage. Esse projeto de pesquisa tem por objetivos determinar a exata localização intracelular da TcMPx, seu interatoma, sua possível migração em condição de estresse oxidativo, especificar qual domínio está voltado para o citosol e sequenciar a proteína de aproximadamente 28kDa. Além disso, determinar o interatoma da TcTPNII e sua localização intracelular nas diferentes formas de T. cruzi. A contribuição da mitocôndria para a sobrevivência do parasita tratado com H2O2 ou agentes genotóxicos será bordada. Os resultados obtidos esclarecerão as estratégias utilizadas pelo parasita para detoxificar os hidroperóxidos e permitirá a identificação de novos alvos que poderão levar ao desenvolvimento de uma terapia mais específica. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

AGUIAR, PEDRO H. N.; FURTADO, CAROLINA; REPOLES, BRUNO M.; RIBEIRO, GRAZIELLE A.; MENDES, ISABELA C.; PELOSO, EDUARDO F.; GADELHA, FERNANDA R.; MACEDO, ANDREA M.; FRANCO, GLORIA R.; PENA, SERGIO D. J.; et al. Oxidative Stress and DNA Lesions: The Role of 8-Oxoguanine Lesions in Trypanosoma cruzi Cell Viability. PLoS Neglected Tropical Diseases, v. 7, n. 6, JUN 2013. (11/20084-9)

PELOSO, E. F.; DIAS, L.; QUEIROZ, R. M. L.; LEME, A. F. P. PAES; PEREIRA, C. N.; CARNIELLI, C. M.; WERNECK, C. C.; SOUSA, M. V.; RICART, C. A. O.; GADELHA, F. R.. Trypanosoma cruzi mitochondrial tryparedoxin peroxidase is located throughout the cell and its pull down provides one step towards the understanding of its mechanism of action. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-PROTEINS AND PROTEOMICS, v. 1864, n. 1, p. 1-10, JAN 2016. (08/57906-3, 11/19872-2, 11/20084-9)

DIAS, L.; PELOSO, E. F.; LEME, A. F. P.; CARNIELLI, C. M.; PEREIRA, C. N.; WERNECK, C. C.; GUERRERO, S.; GADELHA, F. R.. Trypanosoma cruzi tryparedoxin II interacts with different peroxiredoxins under physiological and oxidative stress conditions. Experimental Parasitology, v. 184, p. 1-10, JAN 2018. (11/20084-9, 11/19872-2)