Fitoterápicos padronizados para o tratamento de doenças crônicas: Propriedades citotóxicas, mutagênicas, protetoras e modulação da expressão gênica

Resumo

O programa "Biota/FAPESP" tem como objetivo inventariar e caracterizar a biodiversidade do Estado de São Paulo, definindo os mecanismos para sua conservação, seu potencial econômico e sua utilização sustentável. Alguns estudos preliminares considerando as atividades biológicas de extratos vegetais foram realizados na primeira etapa do projeto; no entanto, o registro de fitoterápicos exige a avaliação de extratos padronizados de acordo com normas internacionais, objetivo dessa segunda etapa. Assim, o presente projeto pretende colaborar dentro deste importante temático por meio da avaliação in vitro das propriedades citotóxicas e mutagênicas dos extratos padronizados de diferentes espécies vegetais do cerrado do estado de São Paulo. Serão empregadas linhagens de células gástricas ACP02 (linhagem tumoral) e cultura primária de células gástricas (linhagem normal), uma vez que os extratos avaliados neste projeto são utilizados no tratamento de desordens e doenças gastrointestinais. Para avaliação da viabilidade celular e do potencial mutagênico dos extratos serão utilizados, respectivamente, o teste de MTT e o teste do micronúcleo com bloqueio de citocinese. A combinação dos corantes laranja de acridina e brometo de etídio, bem como a citometria de fluxo serão utilizadas na avaliação da apoptose. Em paralelo, as atividades protetoras desses extratos também serão avaliadas frente aos danos no DNA e danos citotóxicos induzidos pelo benzo(a)pireno, um potente agente mutagênico. Os extratos que apresentarem atividade protetora em células da linhagem normal, mas não na linhagem tumoral também serão investigados por meio do sistema de reação polimérica em cadeia quantitativa (RT-qPCR array) quanto à expressão de genes envolvidos no estresse oxidativo, defesa antioxidante e processo inflamatório a fim de investigar os mecanismos de ação dos efeitos protetores desses extratos.Palavras-chave: apoptose, células gástricas ACP02, citotoxicidade, fitoterápicos, mutagenicidade, RT-qPCR array.