Interações entre diferentes espécies de Candida na candidose experimental em modelos de invertebrados e vertebrados

Resumo

Devido à alta incidência de lesões de candidose em pacientes imunocomprometidos e a emergência das espécies não albicans, que são frequentemente isoladas em associação com C. albicans nas infecções mistas, torna-se necessário o desenvolvimento de modelos de estudo in vivo para caracterizar as interações entre as espécies de Candida. O objetivo deste estudo será avaliar in vivo as interações entre as diferentes espécies de Candida por meio de indução de candidose experimental em modelo de Galleria mellonella e de camundongos imunossuprimidos. Serão estudadas cepas padrão das seguintes espécies: C. albicans (ATCC 18804), C. tropicalis (ATCC 13803) e C. glabrata (ATCC 90030). As larvas de G. mellonella serão inoculadas com suspensões homotípicas e heterotípicas de Candida (105 células/mL) e incubadas a 37°C durante 5 dias. O número de larvas mortas será avaliado diariamente e a curva de sobrevivência e análise estatística serão realizadas no programa Graph Pad Prism utilizando o teste Log-rank (Mantel-Cox). Para a indução da candidose bucal em camundongos, os animais serão tratados com cloridrato de tetraciclina a 0,83 mg/mL na água de beber e injeções de prednisolona na dose de 100 mg/kg por massa corporal. Os animais serão inoculados com 0,2 mL de suspensões microbianas homotípicas ou heterotípicas contendo 108 células/mL. Após 24 horas da inoculação, amostras do dorso da língua serão coletadas e semeadas em ágar cromogênico HiCrome para contagem de Unidades Formadoras de Colônias por mL recuperadas da cavidade bucal. Em seguida, os animais serão eutanasiados e as línguas retiradas para análise macroscópica e microscópica. A análise dos dados de UFC/mL será feita por Análise de Variância e Teste de Tukey. Para avaliação dos escores obtidos na análise macroscópica e histológica serão aplicados os testes de Kruskal-Wallis e Bonferroni. (AU)