Clonagem de genes de oxidoesqualeno ciclases de Maytenus ilicifolia Mart. ex Reissek

Resumo

Uma importante classe dos metabólitos secundários em plantas é a classe dos triterpenos pentacíclicos. Estes compostos possuem diversas funções como inseticida, antimicrobiana, além de serem muito utilizados na indústria farmacêutica, alimentícia e cosmética. Os triterpenos pentacíclicos são formados por reações de ciclização da molécula de oxidoesqualeno, por enzimas oxidoesqualeno ciclases (OSC), originando também moléculas de metabolismo primário presentes na membrana de eucariotos ou procariotos ou com função hormonal. Visto que até o momento não há, nos bancos de dados, um número de sequências gênicas que permita o conhecimento da variedade de genes e enzimas OSC, este trabalho tem como objetivo contribuir para o conhecimento da diversidade biológica, por meio da clonagem dos genes que codificam enzimas oxidoesqualeno ciclases nas folhas de M. ilicifolia. Após extração do mRNA das folhas de M. ilicifolia, será sintetizado cDNA total, o qual será utilizado para amplificação de fragmentos centrais dos genes de interesse utilizando oligonucleotídeos iniciadores de regiões conservadas de OSCs conhecidas. Posteriormente à clonagem desses fragmentos e sequenciamento, a informação obtida será empregada para o desenho de oligonucleotideos iniciadores específicos, com a finalidade de realizar a extensão das extremidades 5' e 3' de forma eficiente até a clonagem final do fragmento complete. (AU)