Estudos estruturais e funcionais da Proteína de Organização e Compactação do Golgi (GRASP) de Cryptococcus neoformans

Resumo

A secreção de fatores de virulência é um mecanismo crítico para o estabelecimento da Criptococose, uma doença que juntamente com a candidíase representam infecções fúngicas oportunistas no portador de HIV. É uma doença causada pelo patógeno fúngico Cryptococcus neoformans, que aparenta ser a única espécie patogênica do gênero Cryptococcus. A virulência desse patógeno está relacionada à capsula externa formada por diversas biomoléculas produzidas no espaço intracelular e que aparentemente atingem o espaço extracelular através de métodos não convencionais de secreção. Uma característica desses métodos é a de que apesar de ainda serem pouco esclarecidos, dependem da proteína chamada Golgi Re-Assembly and Stacking Proteins (GRASPs). GRASPs tem sido implicadas em uma série de funções tanto em mecanismos de secreção não-convencional quanto de estruturação e organização do aparato de Golgi. Entretanto, seu exato papel em cada situação ainda carece de resultados estruturais e funcionais em nível molecular. É neste contexto que este trabalho se insere: produzir dados que possibilitem a correlação estrutura-função na GRASP de C. neoformans (CnGRASP). Para isso utilizaremos uma série de técnicas experimentais em Biofísica Molecular que vão desde a determinação da estrutura CnGRASP por difração de raios X (até o atual momento apenas o domínio GRASP do ortólogo humano GRASP55 foi elucidado) até o estudo da sua interação com ligantes naturais, como o GXM, e com modelos de membrana biológica através de espectroscopias como a ressonância magnética eletrônica (RME). (AU)