Interações moleculares da proteína de organização e compactação do Golgi (GRASP) de Saccharomyces cerevisiae

Resumo

As Golgi Reassembly and Stacking Proteins (GRASPs) têm sido implicadas em uma série de funções tanto em mecanismos de secreção não convencional quanto de estruturação e organização do aparato de Golgi. Entretanto, seu exato papel em cada situação ainda carece de resultados estruturais e funcionais em nível molecular. A utilização de organismos modelo, como S. cerevisiae, pode ser entendida como uma estratégia para se obter informações detalhadas acerca dos processos celulares em que GRASPs estão envolvidas. Temos a possibilidade de contribuir para geração de conhecimento em dois problemas biologicamente relevantes e atuais: (1) embora GRASPs estejam envolvidas em ampla gama de funções, um entendimento definitivo da função de GRASP em organismos diversos ainda está longe de ser completamente alcançado; (2) detecção e caracterização de regiões intrinsecamente desordenadas em proteínas, este com potencial de produção de dados dentro do contexto mais geral de entendimento do papel de proteínas intrinsecamente desordenadas em processos celulares. Por conseguinte, no presente trabalho temos como objetivo geral produzir dados experimentais que possibilitem um melhor entendimento das interações moleculares atuantes no ciclo funcional de Grh1 (a GRASP de S. cerevisiae), dando um passo fundamental para que se possa compreender o papel de GRASP na célula. Para isso, utilizaremos uma série de técnicas de Biofísica e Biologia Molecular, que vão desde a caracterização estrutural por Ressonância Magnética Nuclear (RMN) (até o momento apenas o domínio GRASP do ortólogo humano GRASP55 foi elucidado) até o estudo da sua interação com ligantes naturais, como a BUG1, e com modelos de membrana biológica através de espectroscopias como a Ressonância Magnética Eletrônica (RME). (AU)