Estudos estruturais e funcionais da proteína de organização e compactação do Golgi (GRASP) de Cryptococcus neoformans

Resumo

A incidência de infecções fúngicas de alta letalidade tem aumentado sobremaneira nos últimos anos, tornando-as um sério problema de saúde pública, principalmente quando envolve pacientes imunocomprometidos. A falta de tratamentos específicos com alta eficiência e baixos efeitos colaterais agrava a situação e faz da busca pelo entendimento dos mecanismos de ação de fungos um tópico de grande interesse. O fungo Cryptococcus neoformans é uma das espécies mais comuns no Brasil e aparenta ser a única espécie patogênica do gênero Cryptococcus. A virulência desse patógeno está relacionada à capsula externa formada por diversas biomoléculas produzidas no espaço intracelular e que aparentemente atingem o espaço extracelular através de mecanismos não convencionais de secreção. Apesar de ainda pouco entendidos, uma característica comum a esses mecanismos é dependência da proteína chamada Golgi Re-Assembly and Stacking Proteins (GRASPs). GRASPs têm sido implicadas em uma série de funções tanto em mecanismos de secreção não-convencional quanto de estruturação e organização do aparato de Golgi. Entretanto, seu exato papel em cada situação ainda carece de resultados estruturais e funcionais em nível molecular. É neste contexto que este trabalho se insere: produzir dados que possibilitem a correlação estrutura-função na GRASP de C. neoformans (CnGRASP). Para isso, utilizaremos uma série de técnicas experimentais em Biofísica Molecular que vão desde a determinação da estrutura CnGRASP por difração de raios X (até o atual momento apenas o domínio GRASP do ortólogo humano GRASP55 foi elucidado) até o estudo da sua interação com ligantes naturais, como o GXM, e com modelos de membrana biológica através de espectroscopias como a ressonância magnética eletrônica (RME). (AU)