Efeitos protetores da melatonina sobre a competência oocitária in vitro

Resumo

Com intuito de reduzir o impacto do estresse térmico sobre a qualidade oocitária, este estudo será conduzido com o objetivo de avaliar a eficácia da suplementação com melatonina em oócitos bovinos expostos à elevadas temperatura durante a maturação in vitro. Para tanto, complexos-cumulus oócitos (COCs) serão destinados a um delineamento experimental fatorial 2 X 6 com duas temperaturas durante a maturação (38,5ºC ou 40ºC)e 6 concentrações de melatonina (0, 0,5, 1,0, 2,0, 5 e 10 nM). COCs serão maturados, em meio contendo diversas concentrações de melatonina, por 22 h à 38,5ºC em atmosfera de 5% CO2 (Controle) ou 40ºC por 12 h em atmosfera de 6% CO2 em atmosfera humidificada e, posteriormente, à 38,5ºC em atmosfera de 5% CO2 por 10 h. Oócitos maturados serão avaliados quanto aos níveis intracelulares de espécies reativas de oxigênio (ROS, e status de maturação nuclear e citoplasmática. Após a maturação, COCs serão fertilizados e os embriões cultivados em 38,5ºC em todos os tratamentos. A clivagem será avaliada 42-44 horas pós-inseminação e a taxa de blastocistos no dia 7 e 8 pós-fertilização. Os efeitos da suplementação com melatonina sobre a competência dos oócitos em suportar a fertilização e se desenvolver em blastocistos será avaliada, bem como o efeito protetor da melatonina na qualidade oocitária pela prevenção dos danos causados pelo estresse térmico. No entanto, gostaríamos de deixar claro que os métodos de análise, o projeto de pesquisa e o plano de trabalho podem ser alterados caso seja necessário, durante o período de estágio no exterior. (AU)